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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
3×100ml
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH自然氧化法)规格
英文名称：
产品规格：3×100ml
发货周期：1～3天
用途
肌纤维、纤维素的染色，尤其适用于横纹肌/平滑肌染色
注意事项
染色液是自然氧化成熟。横纹肌的横纹、纤维素、胞核、红细胞、神经胶质纤维呈深蓝色，胶原纤维、软骨呈棕红色。
储存条件室温，避光，24个月
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
L--亚砜亚细胞增殖
SPA [10-(3-Sulfopropyl)acridinium betaine],SPA [10BCIP/NBT性酯酶显色试剂盒
促释放因子TMB显色(组化或膜HRP显色用)
FMOC-N--L-TMB显色(ELISA HRP显色用)
顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酯DAB辣根过物酶显色试剂盒
1,1-双(二)烯DAB辣根过物酶显色试剂盒
3,3,3-三-1-酰免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠FITC
3,4-二-2-腈免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠DyLight 405
(R,R)-(+)-2,2'-Bis[(S)-(N,N-dimethylamino)(phenyl)免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠Cy5
双(五环二烯)钌(II)免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠Cy3
Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH自然氧化法)规格Cartilage glycoprotein 39,HC gp9 ELISA Kit 软骨糖蛋白39 CAS 897 进口、国产 规格 200mg
Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit 不透光相关蛋白 CAS 进口、国产 规格 50mg
flagellin ELISA Kit 鞭蛋白 CAS 进口、国产 规格 50mg
Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit 多聚血清蛋白 CAS 326729 进口、国产 规格 250mg
cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit 胞浆免疫球蛋白 CAS 723 进口、国产 规格 200mg
Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 纤维介素蛋白 CAS 进口、国产 规格 1ml
Ubiquitin,Ub ELISA Kit 泛素蛋白 CAS 11150 进口、国产 规格 200mg
orosomucoid,ORM ELISA Kit 类粘蛋白 CAS 4618 进口、国产 规格 30mg
Elastin,ELN ELISA Kit 弹性蛋白 CAS 1396331 进口、国产 规格 25mg
Involucrin,iNV ELISA Kit 套膜蛋白 CAS 19856 进口、国产 规格 25mg
tenascin-R,TN-R ELISA Kit 肌腱蛋白R CAS 621 进口、国产 规格 500mg
growth-associated protein 43,GAP3 ELISA Kit 生长相关蛋白43 CAS 250865 进口、国产 规格 200mg
Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit cAMP反应元件结合蛋白 CAS 250865 进口、国产 规格 200mg
Agrin ELISA Kit 聚集蛋白 CAS 250865 进口、国产 规格 200mg
Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit Agouti相关蛋白 CAS 39635 进口、国产 规格 200mg
操作步骤(仅供参考)：
1、Mallory磷钨酸苏木素染色液(PTAH自然氧化法)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。 由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。 8．Mallory氏磷钨酸苏木素液（PTAH） 配方： 苏木素 0.1g
（7）脱水，透明，封片。 2、结果：胶原纤维蓝色， 红细胞桔黄色，核红色。 Mallory 磷钨酸～苏木素染色法（PTAH） 1、试剂配制： 苏木素 0.1 g 磷钨酸 2.0 g 蒸馏水 100 ml 先将苏木素加热溶于 20 毫升蒸馏水, 再将磷钨酸溶于 80 毫升蒸馏水。等苏木素冷却后，加入磷钨酸溶液，混合，放置数星期后，才可使用。如急用，可加入 0.2 g 高锰酸钾, 加速其成熟。 2、染色步骤: （1）切片脱蜡至蒸馏水。 （2）放入 0.25% 高锰酸钾水溶
，洋葱和大蒜由实验室统一种，然后取其所需部分。 石蜡切片法实例（一） —苏木精-伊红对染法 一、目的要求 1、 熟悉石蜡切片的制作过程。 2、 掌握HE染色的基本原理和染色方法。 二、实验原理 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造
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