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- 2025年07月16日
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- 文献和实验
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40
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10mg
1、羰化青DiI(神经元示踪剂)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：羰化青DiI(神经元示踪剂)说明书
英文名称：
产品规格：10mg
发货周期：1～3天
长链二烷基羰花青化合物，特别是Dil（分子量933.88），广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中，进行顺行或逆行的神经示踪分析。Dil不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。Dil标记运动神经元，可在培养基条件下持续跟踪长达四周，在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元，0.2～0.6mm/每天/固定标本，在活体组织里，可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织，Dil的扩增可以持续长达1～2年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移，除非质膜被破坏，比如切片部位
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
7-二-4-香豆素Rubella IgM CLA
2,4-二-5-溴S100 Elisa (not incl. controls, avail. on req order EIA4458)
3--5-氧醇S100A8/S100A9 (mouse/rat) Elisa
3--5-氧腈S100B (human) Elisa
(2--5-)(4-)S100B Elisa
2,4-二氧SALI-TUBES 100
2-萘SALI-TUBES 500
2,5-二-4,6-二烟腈Saliva Control
2-酰-5-啶Salmonella Typhi Antigen (unit = 25 cass.)
N,N-二间sApo1/FAS (human) Elisa
羰化青DiI(神经元示踪剂)说明书L甘异白二肽,甘L异亮英文名(EN)2,2'Dihydroxybiphenyl,特价促销 规格(SP)25G
L高英文名(EN)3,4Diaminotoluene,特价促销 规格(SP)250MG
L高精盐盐英文名(EN)4Methoxyazobenzene,特价促销 规格(SP)1G
L高脯英文名(EN)4Ethynyltoluene,特价促销 规格(SP)5G
L谷英文名(EN)2Iodo,3dimethylbenzene,特价促销 规格(SP)1G
L谷(sigma)英文名(EN)1Phenyldodecane,特价促销 规格(SP)25G
L谷(标准品)英文名(EN)3Ethyltoluene,特价促销 规格(SP)10G
L谷1英文名(EN)1Bromochlorobenzene,特价促销 规格(SP)25G
L谷英文名(EN)1,4Bis(2methylstyryl)benzene,特价促销 规格(SP)1G
L谷叔盐盐英文名(EN)4lsopropyltoluene,特价促销 规格(SP)500ML
L谷5英文名(EN)Isobutylbenzene,特价促销 规格(SP)100ML
L谷α英文名(EN)1,2Diethylbenzene,特价促销 规格(SP)1ML
L谷γ英文名(EN)2,4Dichloronitrobenzene,特价促销 规格(SP)25G
L谷二盐盐英文名(EN)secButylbenzene,≥特价促销 规格(SP)25ML
L谷二盐盐英文名(EN)pBromotoluene,98%特价促销 规格(SP)25G
L谷，一水英文名(EN)Quintozene,≥94%特价促销 规格(SP)25G
L谷盐盐英文名(EN)2aminonitrotoluene,特价促销 规格(SP)25G
L谷英文名(EN)2,4Dinitrotoluene,特价促销 规格(SP)100G
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文献和实验;13818765978（也是飞信账号） MSN:yonghong10288@hotmail.com QQ:806680039；583940292 E-mail： king@biogot.com ；yonghong1028@126.com Web：www.biogot.com 抗体大王采购帮忙热线：4006609091 说明书下载请上bioworld抗体国外官方网址： www.bioworlde.com
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