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- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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29
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
25ml
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：姬姆萨染液(10×)价格
英文名称：
产品规格：25ml
发货周期：1～3天
姬姆萨染料为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物，本染色液最适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色。
染前用蛋白酶等进行处理，然后再用姬姆萨染液染色，在染色体上，可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
试剂盒组份
10×姬姆萨染色原液25mL
10×姬姆萨稀释液25mL
染色步骤1.根据需要量，取8ml双蒸水，加入姬姆萨原液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml，混匀即为工作液，此工作液常温可保存两周（如果无法短期用完，请确保姬姆萨原液不要见到水或者其他缓冲液）。2.按常规方法制备血涂片，待血膜干后，用甲醇固定2～3分钟；3.将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加2~3滴染色工作液，使覆盖全部血膜（具体用量视样品大小而定），室温染色15～30分钟。4.用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。
四、注意事项1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2.如果染色过浓或者过淡，请调整姬姆萨原液加入量（姬姆萨原液最常用的稀释比例是10倍，但有时候可能会稀释5倍或者15倍）。3.姬姆萨原液采用常规方法配制（姬姆色素甘油甲醇=16666），请在使用时小心不要接触到水。否则时间长了会失效。
储存2～8℃，避光，有效期12个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
姬姆萨染液(10×)价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4-啶-N-物Toolans H-1 Virus (rat) EcoElisa
-D-半乳糖苷TORCH IgM screening (capture) Elisa (w/o CE) (min. order 10 kits)
2--5-溴-3--4-啶Toxocara Canis IgG
5-溴-6-氧烟酯Toxoplasma gondii IgA Elisa
2-羟-5-啶Toxoplasma gondii IgG (quantitative)
次一水合物Toxoplasma gondii IgM
1-溴-4,5-二-2-（易制爆）Toxoplasma IgG (TORCH)
1,4,7,10-四环十二四盐盐Toxoplasma IgM (TORCH)
5-吲哚-3-t-PA (human) Elisa
N-TPO (Thyroid Peroxidas) Anti-TPO
姬姆萨染液(10×)价格D阿洛糖(>98%,BR)英文名(EN)Fetal Bovine Serum特价促销 规格(SP)100ML
D葡萄糖盐英文名(EN)Fetal Bovine Serum特价促销 规格(SP)100ML
D葡萄糖盐盐英文名(EN)2,4Difluorotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半胱盐盐一水英文名(EN)2Bromo,3,5triisopropylbenzene,特价促销 规格(SP)5G原装
D半糖英文名(EN)2,3Difluorotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖(标准品)英文名(EN)4Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
D半糖盐盐英文名(EN)1Bromo(trifluoromethoxy)benzene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖英文名(EN)4Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
D半糖(标准品)英文名(EN)2,3,4Trifluorotoluene,特价促销 规格(SP)500MG
D半糖英文名(EN)3Fluoronitrotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖盐英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)1G
D英文名(EN)Formic acid,≥特价促销 规格(SP)100ML
D盐盐英文名(EN)AMBERLITE XAD 7HP特价促销 规格(SP)250G
D叔盐盐英文名(EN)Cycloheximide (Biotechnology Certified)特价促销 规格(SP)100MG
D别苏英文名(EN)Hydrindantin dihydrate特价促销 规格(SP)5G
D别异亮英文名(EN)4(Dimethylamino)benzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
D英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,特价促销 规格(SP)10G
D盐盐英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：姬姆萨染液(10×)价格
英文名称：
产品规格：25ml
发货周期：1～3天
姬姆萨染料为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物，本染色液最适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色。
染前用蛋白酶等进行处理，然后再用姬姆萨染液染色，在染色体上，可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
试剂盒组份
10×姬姆萨染色原液25mL
10×姬姆萨稀释液25mL
染色步骤1.根据需要量，取8ml双蒸水，加入姬姆萨原液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml，混匀即为工作液，此工作液常温可保存两周（如果无法短期用完，请确保姬姆萨原液不要见到水或者其他缓冲液）。2.按常规方法制备血涂片，待血膜干后，用甲醇固定2～3分钟；3.将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加2~3滴染色工作液，使覆盖全部血膜（具体用量视样品大小而定），室温染色15～30分钟。4.用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。
四、注意事项1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2.如果染色过浓或者过淡，请调整姬姆萨原液加入量（姬姆萨原液最常用的稀释比例是10倍，但有时候可能会稀释5倍或者15倍）。3.姬姆萨原液采用常规方法配制（姬姆色素甘油甲醇=16666），请在使用时小心不要接触到水。否则时间长了会失效。
储存2～8℃，避光，有效期12个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
姬姆萨染液(10×)价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
4-啶-N-物Toolans H-1 Virus (rat) EcoElisa
-D-半乳糖苷TORCH IgM screening (capture) Elisa (w/o CE) (min. order 10 kits)
2--5-溴-3--4-啶Toxocara Canis IgG
5-溴-6-氧烟酯Toxoplasma gondii IgA Elisa
2-羟-5-啶Toxoplasma gondii IgG (quantitative)
次一水合物Toxoplasma gondii IgM
1-溴-4,5-二-2-（易制爆）Toxoplasma IgG (TORCH)
1,4,7,10-四环十二四盐盐Toxoplasma IgM (TORCH)
5-吲哚-3-t-PA (human) Elisa
N-TPO (Thyroid Peroxidas) Anti-TPO
姬姆萨染液(10×)价格D阿洛糖(>98%,BR)英文名(EN)Fetal Bovine Serum特价促销 规格(SP)100ML
D葡萄糖盐英文名(EN)Fetal Bovine Serum特价促销 规格(SP)100ML
D葡萄糖盐盐英文名(EN)2,4Difluorotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半胱盐盐一水英文名(EN)2Bromo,3,5triisopropylbenzene,特价促销 规格(SP)5G原装
D半糖英文名(EN)2,3Difluorotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖(标准品)英文名(EN)4Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
D半糖盐盐英文名(EN)1Bromo(trifluoromethoxy)benzene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖英文名(EN)4Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
D半糖(标准品)英文名(EN)2,3,4Trifluorotoluene,特价促销 规格(SP)500MG
D半糖英文名(EN)3Fluoronitrotoluene,特价促销 规格(SP)1G
D半糖盐英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)1G
D英文名(EN)Formic acid,≥特价促销 规格(SP)100ML
D盐盐英文名(EN)AMBERLITE XAD 7HP特价促销 规格(SP)250G
D叔盐盐英文名(EN)Cycloheximide (Biotechnology Certified)特价促销 规格(SP)100MG
D别苏英文名(EN)Hydrindantin dihydrate特价促销 规格(SP)5G
D别异亮英文名(EN)4(Dimethylamino)benzaldehyde,特价促销 规格(SP)25G
D英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,特价促销 规格(SP)10G
D盐盐英文名(EN)2Fluoronitrotoluene,98%特价促销 规格(SP)5G
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
膜，故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高，可使染料进入细胞内而使细胞着色（蓝色）。细胞计数一般用血细胞计数板，按白细胞计数方法进行计数，便于确定细胞的生活状况。 实验内容与方法 （一）制备动物细胞悬液 将动物细胞用生物盐水制备成适当浓度的细胞悬液备用。 （二）细胞计数 1. 计数板处理 用无水乙醇或95%乙醇溶液擦拭计数板后，用绸布擦净，另擦净盖玻片一张，把盖片覆在计数板上面。 2. 染色 用滴管吸取0.4%台盼蓝染液，按1∶1比例加入细胞
检测等。细胞悬液制备后，常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色，进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色。而死亡细胞的细胞膜通透性增高，可使染料进入细胞内而使细胞着色（蓝色）。细胞计数一般用血细胞计数板，按白细胞计数方法进行计数，便于确定细胞的生活状况。实验内容与方法（一）制备动物细胞悬液将动物细胞用生物盐水制备成适当浓度的细胞悬液备用。（二）细胞计数计数板处理用无水乙醇或 95% 乙醇溶液擦拭计数板后，用绸布擦净，另擦净盖玻片一张，把盖片覆在计数板上面。染色用滴管吸取 0.4% 台盼蓝染液
1 ）结晶紫检测法 1．在96孔 细胞培养 板各孔中加0.1ml含5×10 4 ～10× 4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO 2 的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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