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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
301
- 英文名:
BglII
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
500U
特别提示:包括BglII内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:BglII内切酶
英文名称:BglII
产品货号:GS2075
产品规格:500U
储存条件:冷冻(-20℃)
技术规格
| Unit definition | One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1μgof Lambda DNA in 1hourat 37℃ in a total reaction volume of 50μl. |
| Recognition sites | A↑GATCT |
| 来源 | Isolated from an E.coli strain that carries the cloned Bgl II gene from Bacillus globigii |
| Assayed on | Lambda DNA |
| Optimal buffer | O(50mMTris-HCl(pH 7.6 at 25℃);10 mM MgCl2;100 mM NaCl;1 mM DTT.) |
| Optimal temperature | 37℃ |
| Storage conditions | 10 mM Tris-HCl(pH 7.5);50mMNaCl;0.1 mM EDTA;7 mM 2-mercaptoethanol;200 μg/ml BSA;50%glycerol.Store at -20℃. |
| Ligations | After 10-fold overdigestion with enzyme more than 90%of the DNA fragments can be ligated and recut. |
| Non-specific hydrolisis | No nonspecific activity was detected after incubation of 1μgof Lambda DNA with 20 u.a.of enzyme for 16hoursat 37℃. |
| Methlation effect | Not blocked by overlapping dam methylation(GmATC)AGATCT |
| Thermal inactivation | enzyme is inactivated by incubation at 80℃ for 20 mins. |
我公司销售的BglII内切酶报价,BglII限制性内切酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验RNA PolyIII 聚合酶转录终止位点,且两端分别设计酶切位点。5. pSUPER 载体进行 BglII,HindIII 的双酶切。获得线性质粒载体。6. DNA 双链和病毒载体的连接。7. 连接产物的转化。8. 测序验证 ShRNA 序列是否连接到载体。9. 将质粒转染细胞验证 ShRNA 敲减效率。以上是 shRNA 的茎环引物设计方法,在构建其它慢病毒或者腺病毒质粒时,方法是通用的。但是,对于以下几种情况:(1)不同的质粒,(2)选用不同的限制性内切酶,(3)连接质粒时选用重组或者黏性
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
分。Target preparation 总共用250ngDNA ,用20单位的限制性内切酶EcoRI、BglII 或者 XbaI ( New England Biolabs(NEB)) 在37度消化4小时。在75度热失活20分钟,消化后的DNA 同0.25 μM 的接头和DNA 连接酶在标准连接缓冲液(NEB)中16度共同孵育4小时。然后在95度孵育5分钟热激活酶。通过扩增连接了接头的DNA 来扩增靶目标,PCR缓冲液II(Perkin Elmer)包含2.5 mM MgCl2 、250μM dNTP
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