- ￥171
- 丽山生物
- E0014-100
- 济南
- 2026年01月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
LSfast™ BglII
- 保质期：
2年
- 供应商：
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件：
﹣20℃
- 规格：
100 rxns
产品介绍
5'...A ↓ G A T C T...3'
3'...T C T A G ↑ A...5'
LSfast™ BglII 快速内切酶可识别A^GATCT位点，并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 37°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ BglII |
100 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
1 ml |
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10× LSfast™ Color Buffer |
1 ml |
失活条件
不可热失活，请使用酚氯仿抽提或柱纯化。
甲基化敏感性
对于被 EcoBI 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
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文献和实验RNA PolyIII 聚合酶转录终止位点，且两端分别设计酶切位点。5. pSUPER 载体进行 BglII，HindIII 的双酶切。获得线性质粒载体。6. DNA 双链和病毒载体的连接。7. 连接产物的转化。8. 测序验证 ShRNA 序列是否连接到载体。9. 将质粒转染细胞验证 ShRNA 敲减效率。以上是 shRNA 的茎环引物设计方法，在构建其它慢病毒或者腺病毒质粒时，方法是通用的。但是，对于以下几种情况：（1）不同的质粒，（2）选用不同的限制性内切酶，（3）连接质粒时选用重组或者黏性
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)（BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等） 在分子克隆实验中，限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体，要根据载体选择合适的内切酶（当然，使用T载就不必考虑了）。先将引物设计好，然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
分。Target preparation 总共用250ngDNA ，用20单位的限制性内切酶EcoRI、BglII 或者 XbaI ( New England Biolabs(NEB)) 在37度消化4小时。在75度热失活20分钟，消化后的DNA 同0.25 μM 的接头和DNA 连接酶在标准连接缓冲液（NEB）中16度共同孵育4小时。然后在95度孵育5分钟热激活酶。通过扩增连接了接头的DNA 来扩增靶目标，PCR缓冲液II(Perkin Elmer)包含2.5 mM MgCl2 、250μM dNTP
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