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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
158
- 英文名:
2×SDS-PAGE loading buffer
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
5ml
特别提示:包括2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
英文名称:2×SDS-PAGE loading buffer
产品货号:KFS083
产品规格:5ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚bǐng烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料, 2×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。
操作步骤
1. 按每1 微升蛋白样品加入1 微升2×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
我公司销售的2×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验,约每克湿菌加3 mlTE 缓冲液。② 按超声处理仪厂家提供的功能参数进行破菌;10 000g 离心,15min ,分别收集上清液和沉淀。③ 分别取少量上清和沉淀,加入等体积的2× 凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS -PAGE 。注意事项:超声破碎与声频、声能、处理时间、细胞浓度、菌种类型等因素有关,应根据具体情况掌握;超声波破菌前,标本经3 -4 次冻溶后更容易破碎。2 )包涵体的分离蛋白质在细菌中的高水平表达,常形成相差显微镜下可见到的细胞质颗粒,即为包涵体,经离心沉淀后可用Triton
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
蛋白浓度测定试剂盒。 2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进行配制,也可以使用碧云天生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒。该试剂盒提供了除水和配 胶器具外的所有试剂以及配制各种浓度SDS-PAGE的配方。 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋 白上样缓冲液可以减小上样
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