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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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1ml|5ml
特别提示:包括变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)
产品货号:GL1282
产品规格:1ml|5ml
用途:
核酸杂交
储存条件:-20℃,12个月
我公司销售的变性鲑鱼精DNA(10mg/ml)北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验【基本原理】 普遍采用的碱变性法具有操作简便、快速、得率高的优点。其主要原理是,利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在碱变性条件下(pH 12.6),染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当以pH 4.8的乙酸钠将其pH调到中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA
顺序,故以非重复核苷酸对表示的复杂性直接体现基因组大小(图上方的箭头所指为基因大小),对于真核生物基因组中的非重复片段也是如此。在标准条件下(一般为0.18ml/L阳离子浓度,400核苷酸长的片段)测得的复性率达0.5时的Cot值(称Cot1/2),与核苷酸对的复杂性成正比。对于原核生物核酸分子,此值可代表基因组的大小及基因组中核苷酸对的复杂程度。真核基因组中因含有许多不同程度的重复序列(repetitive sequence),所得到的Cot曲线更为复杂。 DNA的变性和复性原理,现已
液(8 cm × 8 cm 的膜加 5 mL 即可),将膜的背面贴紧杂交瓶壁,正面朝向杂交液。放入 42 ℃ 杂交炉中,使杂交体系升到 42 ℃。取经超声粉碎的鲑鱼精 DNA(已溶解在水或 TE 中)100 ℃ 加热变性 5 min,迅速加到杂交瓶中,使其浓度达到 100 μg/mL。继续杂交 4 hr。鲑鱼精 DNA 的作用是封闭 NC 膜上没有 DNA 转移的位点,降低杂交背景、提高杂交特异性。2.杂交倒出预杂交的杂交液,换入等量新的已升温至 42 ℃ 的杂交液,同样加入变性的鲑鱼精 DNA。将探针
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