0.5%焦油紫染色液说明书

操作步骤(仅供参考)：
1、0.5%焦油紫染色液说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：0.5%焦油紫染色液说明书
英文名称：Tar purple Staining Solution
产品规格：50mL
发货周期：1～3天
本产品以进口焦油紫作为核心染料，焦油紫具有感光作用，能够很好地显示尼氏体的变化。尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况，尼氏体会发生溶解，甚至消失。可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色。
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒，即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质，也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。尼氏体(Nisslbody)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲蓝和焦油紫等染料染成蓝紫色。各种神经细胞内斗含有尼氏体，但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体会因生理状态的变化而变化，是神经元内合成蛋白质的重要部位，当神经元受到刺激后，包体内的尼氏体会明显减少。
储存条件常温运输和保存，有效期半年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 4-(二)盐盐L-半胱盐盐无水物/L-2--3-巯盐盐/L-Cysteine Hydrochloride Anhydrous
 3,4-二马尿酰-组酰-亮/N-Hippuryl-His-Leu hydrate
 3-羟-3--2-芴氧羰-O-叔-L-苏/Fmoc-O-叔-L-苏/Fmoc-Thr(tBu)-OH
 N-Cbz-L-蛋芴氧羰-O-叔-L-酪/Fmoc-O-叔-L-酪/Fmoc-Tyr(tBu)-OH
 利赛芴氧羰酰-N--L-缬/Fmoc-N--L-缬/Fmoc-N-Me-Val-OH
 α-(4-啶)二醇芴氧羰-N-三-L-组/N-Fmoc-N-三-L-组/Fmoc-His(Trt)-OH
 5,6,7,7a-四噻吩并[3,2-c]啶-2(4H)-盐盐芴氧羰-N-三-D-半胱/N-Fmoc-N-三- D-半胱/Fmoc-D-Cys(Trt)-OH
 2,2-双(4-氧)王树脂/Wang resin
 Nα-对酰-L-精三树脂/Trityl chloride resin
 4-溴-9,9'-螺二芴Rink Amide AM树脂/Rink Amide AM resin
0.5%焦油紫染色液说明书2脱L胸苷/替比夫定英文名(EN)TPPTS,≥95.0%特价促销  规格(SP)250MG
2'脱βL苷英文名(EN)Vanillic acid,≥97.0%特价促销  规格(SP)25G
2'脱胞苷'二三盐(分子生物学级)英文名(EN)Thiabendazole,98%特价促销  规格(SP)25G
2'脱胞苷''(dCMP)英文名(EN)Hymexazol,特价促销  规格(SP)5G
2'脱肌苷英文名(EN)Prohexadione calcium,90%特价促销  规格(SP)5G
2'脱肌'(>98%,BR)英文名(EN)Glyphosine,特价促销  规格(SP)5G
2'脱鸟苷3C,15N2英文名(EN)OMethylbroussochalcone B (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)20MG
2'脱鸟苷'单二英文名(EN)Esculentoside H (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)20MG
2'脱鸟苷5'二二盐英文名(EN)Swertiajaponin (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)20MG
2'脱鸟苷'一二盐(分子生物学级)英文名(EN)Ajugasterone C (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)10MG
2'脱鸟苷一水合物英文名(EN)Hirsuteine (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)5MG
2'脱尿苷'三三盐英文名(EN)Wilfortrine (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)10MG
2'脱脱胸苷'二三盐英文名(EN)Timosaponin A1 (HPLC,≥94%)特价促销  规格(SP)10MG
2'脱苷5'二三盐(>,BR)英文名(EN)Hydroxy Sprengerinin C, 17 (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)10MG
2'脱胸苷'一二盐英文名(EN)Precyasterone (HPLC,≥96%)特价促销  规格(SP)5MG
2芴(>95.0%(T))英文名(EN)Raddeanoside 20 (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)5MG
2咪唑 英文名(EN)Pseudoginsenoside RT1 (HPLC,≥98%)特价促销  规格(SP)20MG
2芴(>99.0%(HPLC))英文名(EN)Orientin 2''Optranscoumarate,HPLC...特价促销  规格(SP)10MG