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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
28
- 英文名：
Glycogen PAS stain (for fungi)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
3×50mL
一、糖原PAS染色液(真菌专用)规格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：糖原PAS染色液(真菌专用)规格英文名称：Glycogen PAS stain (for fungi)
产品规格：3×50mL
发货周期：1～3天
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该技术不仅能显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过酸(又称高酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。
本公司糖原PAS染色液(真菌专用)利用真菌含有多糖，过酸氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基，醛基与无色Schiff结合呈现红色。
产品特点
染色稳定。
特异性强。
操作简捷，仅需半小时。
浓度低过酸更适用于对真菌染色，无盐酸乙醇分化液分化步骤。
储存条件低温运输，溶液A和溶液B需4℃避光保存，溶液C可室温避光密闭保存，有效期6个月。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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对羟庚酯噻隆/脱叶灵/脱叶脲/脱落宝/N--N-1,2,3-噻二唑-5-脲/赛隆/TDZ
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3羟奈韦拉平英文名(EN)3Hydroxynaphthalene,7disulfonic ac...特价促销 规格(SP)25G
3'羟伐他汀英文名(EN)γPolyglutamic acid (分子量70万)特价促销 规格(SP)1G
3去嘌呤英文名(EN)Cyclosporin C特价促销 规格(SP)20MG
3去维库溴铵英文名(EN)Chitosan oligosaccharide (mol wt 3000)特价促销 规格(SP)100G
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3邻二腈(>98.0%(GC))英文名(EN)Aminoguanidine hydrochloride,≥98%特价促销 规格(SP)25G
3溴,10邻二菲(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)Isoprenaline Hydrochloride,特价促销 规格(SP)5G
3溴二 英文名(EN)Homogentisic acid,特价促销 规格(SP)50MG
3溴菲(>98.0%(GC))英文名(EN)Flumequine,特价促销 规格(SP)1G
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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