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- 百奥莱博
- MT0031-WYB
- 北京
- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
278
- 英文名：
Klenow Fragment(exo-)
- 保质期：
3年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
250U|2500U
特别提示：包括Klenow片段(无核酸外切酶活性)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Klenow片段(无核酸外切酶活性)
英文名称：Klenow Fragment(exo-)
产品货号：MT0031
产品规格：250U|2500U
Klenow片段是DNA聚合酶I的N末端截短物，本制品经过改造无任何外切酶活性，仅包含了DNA聚合酶活性，广泛应用于用随机引物制备探针、随机引物法标记、cDNA第二条链的合成等试验。需要注意的是该酶不能用于产物平端不齐。
产品组成：
| 组分 | 250U | 2500U |
| Klenow Fragment(exo-)（5 U/μl) | 50μl | 500μl |
| *10×Klenow Buffer | 1ml | 1ml×2 |
*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl（pH 8.0 at 25 ℃), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT.该酶兼容PCR Buffer和内切酶Buffer。
保存条件：-20℃，有效期3年。
单位定义：一个活力单位即在37℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
热失活：75℃，20分钟失活。
我公司销售的Klenow片段(无核酸外切酶活性)北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验mol/LMg2+ 模板：PCR对模板的要求不高，单、双链DNA均可，但样品中不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制剂以及能与DNA结合的蛋白质。添加剂：DMSO（二甲基亚枫），提高扩增效率及特异性（1）理论上PCR合成产物的数量经过每轮循环都将增加一倍，应按2n的指数方式递增，PCR反应30轮循环后，PCR扩增应达到230个拷贝，约109个拷贝。但由于DNA聚合酶的质量、待扩增片段的序列及反应系统的条件等各种因素的影响，实际扩增效率比预期的要低，一般可达106－107个拷贝平台效应”：PCR反应
常规片断级的选择指南： 所谓常规级，即回收片段大小介于100bp和10kb之间，在这个范畴内包含了一般的质粒或者克隆片段的回收。主流方法是柱回收试剂盒。1. Qiaquick Gel Extraction Kit品牌：Qiagen回收范围：70bp-10kb特点：高达80%回收率操作快速简单，3步完成70bp-10kb片段的回收提供三色指示剂的电泳上样loading Buffer,方便判断和操作回收产物纯度高，可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外
来自Bacillus thuringiensis(Bt，苏云金杆菌)的一种2kb的蛋白质基因。在实验过程中使用的引物末端出现了差错,模板链上是A的位点，其对应的引物位点也是A，这一位点不匹配导致了PCR扩增反应终止,未得到预期产物。Barnes用的聚合酶是Klentaq1，是TaqDNA聚合酶N端缺失突变体，无外切酶和内切酶活性。为解决模板--引物不匹配问题,他试着用另一种聚合酶Pfu来代替Klentaq1，此酶具3→5外切酶功能，但结果还是没有得到预期产物。Barnes设想Pfu可能过多地切掉了引物末端的核苷
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