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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
Universal Whole Genome Amplification Kit
- 库存:
908
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京现货通用型全基因组扩增试剂盒供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货通用型全基因组扩增试剂盒供应
产地:国产|进口
英文名:Universal Whole Genome Amplification Kit
编号:BTN100941
品牌:百奥莱博
规格:30次
本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒,可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。
产品特点:
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
2.可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
3.可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异,SNP,STR)等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| WGA溶液A | 75μl |
| WGA溶液B | 30μl |
| dNTP(10mM) | 20μl |
| BSA | 10μl |
| 超纯水 | 1ml |
| Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL) | 15μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
本产品适用于纯化好的基因组DNA。
1.在PCR塑料管中加入1μL纯化好的基因组DNA,用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A,1μL WGA溶液B,超纯水4.3μL,轻柔吹打混合均匀(现在PCR管中总体积为8.8μL)。
3. 95℃保温3~5分钟,室温短暂离心半分钟,然后冰上放置15分钟。
4. 然后依次向上述反应液中加入0.5μL dNTP,0.2μL BSA,0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
5. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
7. 立即取3μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意:WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料,所以需要先加上样缓冲液。
8.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。
我公司的北京现货通用型全基因组扩增试剂盒供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号:BTN130842
英文名称:Staphylococcus RNA extraction kit
规格:50次
·YPD液体培养基(YPD酵母培养基)
编号:BTN130895
英文名称:YPD Liquid Medium
规格:250mL
YPD培养基又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,主要成分为Yeast Extract(酵母膏),Peptone(蛋白胨),Dextrose(glucose)(葡萄糖),为最常用的酵母培养基之一,本产品为经过优化的即用型YPD液体培养基,即开即用。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
·牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)
编号:BTN120404
英文名称:Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
规格:500U
牛小肠碱性磷酸酶与E.coli来源的碱性磷酸酶相同,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解,对ATP等的焦磷酸键水解速度较慢。由于CIAP处理后的DNA片段缺少连接酶所要求的5´磷酸末端,因此它们不能进行自连接。这个特性可以在克隆时降低载体DNA的背景。
产品用途:
1.去除载体DNA片段的5´-末端的磷酸基;
2.防止克隆载体的自连接;
3.蛋白质丝*酸、苏*酸和酪*酸的去磷酸化;
4.为5´末端标记准备模板。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| CIAP(10~30U/μl) | 500U |
| 10×CIAP Buffer | 0.5mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在37℃、pH9.8的条件下,1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。
纯度:
1.30 U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.30 U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.18 U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应16小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
使用举例:
1.在微量离心管中配制50μL反应体系:
| 成分 | 加入量 |
| DNA Fragment in TE Buffer | 1~20pmol |
| 10×CIAP Buffer | 5μl |
| CIAP(10~30units/μl) | 1-2μl |
| 补水到 | 50μl |
2.37℃或50℃反应30分钟。或者先37℃反应15分钟,再50℃反应15分钟。注意:单链DNA和具有5´突出末端的DNA在较低温度下(如37℃)即可去磷酸化,而具有3´突出末端的DNA或平末端DNA需要较高温度(如50℃)才能去磷酸化。
3.*酚/*仿/异戊醇(25:24:1)抽提2次。注意:如果早在*酚抽提之前,用自备的蛋白酶K降解CIAP酶,则效果更好。具体做法是:加入EDTA和SDS使其终浓度为5mM EDTA和0.5% SDS,最后加入蛋白酶K溶液,使其终浓度为50μg/mL,然后56℃处理30分钟,再75℃孵育10分钟。然后用于*酚/*仿/异戊醇抽提。
4.*仿/异戊醇(24:1)抽提1次。
5.添加2.5μl的3M NaCl(终浓度150mM)。
6.添加125μl的(2.5倍量)冷乙醇,在-20℃下放置30~60分钟。
7.13000g离心20分钟后,小心去上清。
8.用1mL 75%乙醇洗涤一次。
9.干甩数秒,小心吸弃上清。
10.用20μl以下的TE Buffer溶解DNA沉淀待用或放-20℃长期放置。
北京现货通用型全基因组扩增试剂盒供应关键词:BTN100941,通用型全基因组扩增试剂盒,Universal Whole Genome Amplification Kit
·酵母tRNA溶液(精提)
编号:BTN70904B
英文名称:Yeast tRNA Solution
规格:1.5mL
本产品分A和B两个规格,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时最好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果最后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。
二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
| 盐 | 终浓度 |
| NH4OAc(醋酸铵) | 0.5M |
| NaCl(*化*) | 0.25M |
| NaOAc(醋酸*) | 0.3M |
2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。
三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,最好使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。
北京现货通用型全基因组扩增试剂盒供应关键词:BTN100941,通用型全基因组扩增试剂盒,Universal Whole Genome Amplification Kit
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