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常用监测细胞自噬的方式是构建LC3-GFP(绿色荧光蛋白)融合蛋白,LC3蛋白可以和自噬体膜发生特异性结合,GFP作为示踪剂。但是构建LC3-GFP融合基因,转染,表达需要一定时间,而且LC3-GFP表达不理想也会影响细胞自噬的检测。该试剂盒采用申请专利的自噬荧光检测试剂,免去转染表达的时间,特异性高于LC3。
细胞自噬定量检测试剂盒,可在活细胞内进行实验,无需细胞转染。
传统的GFP-LC3法需要进行细胞转染,GFP-LC3的转染效果和表达效果影响自噬的检测。
适用于筛选自噬激活剂与抑制剂
应用:流式细胞仪,荧光显微镜, 荧光检测和高通量筛选
试剂盒组成: Cyto-ID® 绿色检测试剂(自噬检测试剂)
Hoechst 33342 核染色
自噬诱导剂(Rapamycin)自噬诱导剂(Chloroquine)
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文献和实验水平的高低。LC3 这一转变过程可被 Western Blot 和荧光显微镜检测到,现已成为监测自噬体形成的推荐方法。在哺乳动物中,LC3 包含 3 种亚型:LC3A、LC3B、LC3C,分布在不同的组织中,因此需要用不同的抗体去鉴定这3种亚型。 和元生物能够提供成熟的细胞自噬相关的技术服务 GFP-LC3 单荧光自噬指示体系: 利用 LC3 在自噬形成过程中发生聚集的现象构建了 GFP-LC3 指示体系,无自噬时,GFP-LC3 融合蛋白弥散在胞浆中;自噬形成时,GFP-LC3 融合
的研究方法正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有: 1. 自噬诱导剂 Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激 Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chloride(氯化锂):IMPase 抑制剂(即 Inositol monophosphatase,肌醇单磷酸酶) Earle's 平衡盐溶液:制造饥饿 N-Acetyl-D
重磅综述:年发文量近 10000,自噬领域第 4 版研究指南发布
多篇,全面综述并介绍了自噬研究领域的最新进展,总结并归纳了自噬研究的相关方法。 图片来源:Autophagy 官网 在自噬研究中,一套用于自噬研究的标准化指南是十分必要的,Autophagy 杂志于 2008 年发布第一版自噬指南,从那以后自噬这个话题受到越来越多的关注,许多科学家进入了这一领域,自噬相关的知识库和相关的新技术也在不断地更新和扩展。因此,定期更新自噬研究指南以监测不同生物体中的自噬能够鼓励该领域的知识和技术创新,具有非常重大的科学意义。那么何为细胞自噬?细胞自噬
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