杂交瘤细胞抗AChE说明书

细胞培养步骤:
一．杂交瘤细胞抗AChE说明书培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
资源名称    杂交瘤细胞抗AChE说明书
种属:AE-1
类型:B淋巴细胞,淋巴瘤
形态:淋巴母细胞
培养方法
培养基:DMEM培养基(GIBCO,货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。
生长特性:悬浮生长

注意事项： 
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们。 
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。 
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 Human
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E 红白细胞白血病细胞，HEL299细胞 PT67细胞，鼠逆转录酶病毒包装细胞
前脂肪细胞分化培养基PADM-prf
LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A5
BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胰腺上皮细胞完全培养基 100mL
HEF细胞，人胚纤维细胞系 奇异变形杆菌 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA
CXCL12 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL12 / SDF-1 蛋白
Neuro-2a/N2a(小鼠脑神经瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 中东呼吸综合征冠状病毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 Human
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E 红白细胞白血病细胞，HEL299细胞 PT67细胞，鼠逆转录酶病毒包装细胞
前脂肪细胞分化培养基PADM-prf
LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人细胞裂解液 (阳性对照)
蜜蜡，英文名或英文缩写：Bees wax,white，级别：BR，98%，规格：25克
6盐酸罗哌卡因有关物质A对照品2,6DImetxYLANILINE xy7noCHLORIDE
5(thien2yl)thiopxene2carbonitnile 29
2乙基膦 Diethyl 2bromoethylphosphonate,97% 5324301 5G 通用试剂
甘露醇录化内琼脂 Nc
杂交瘤细胞抗AChE说明书尿苷5′三嶙酸三钠盐，英文名或英文缩写：5′UTP,3Na，级别：BR，99%，规格：1000U
92乙基2(羟甲基)1，3Trimetxylol propane
ALKALINEPHOSPHATASE,2COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级COLDsigma
α甲基肉桂醛 αMethyltranscinnamaldehyde,98% 10 25G 通用试剂
硫代酸钠//Sodium ate AR，80%， 25克 国产/进口
公司供应的细胞仅用于科研实验。