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Phos-tag磷酸化蛋白分析新产品-丙烯.酰胺预制胶

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  • 2025年12月02日
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    "Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
       Phos-tag™是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
    ◆Phos-tag™ 的基本结构:

    特点:
    与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
    在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
    ◆原理:

     
    ◆相关应用:

     
     
    ◆相关产品:
     产品名称  用  途
     Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS - PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
     SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
     Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
     Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
     Phos-tag™ Mass
     Analytical Kit
     分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度
     
    SuperSep Phos-tag™预制胶即开即用!
    phos-tag™由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
    SuperSep Phos-tag™是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

     
     
     
     板大小  100 x 100 x 3 (mm)
     凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
     孔数  13  17
     孔容积  30 μL  25 μL
     Phos-tag™浓度  50 μmol/L
     丙烯.酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
     ZnCl2浓度  100 μmol/L
     
     
    注意:
      这款产品为预制胶,适合用于“EasySeparator”电泳槽。
      使用预染的maker会使条带弯曲。推荐使用WIDE-VIEW Prestained Protein Size Marker III。
      在使用产品之前,参考“SuperSep Ace”或者其它常用的SDS-PAGE摸索样品的电泳条件。
      进行Western blotting之前,需要用EDTA先处理再进行转膜。
    优点、特色:
    u  即开即用。
    u  预制胶使用安全。
    u  可长期保存(6个月)。
    u  操作与普通SDS-PAGE一样。
    ◆案例、应用:
      电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
      样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
      普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
      条带。
      样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
      电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
      染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
      P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
      P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
      A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
     

    ◆相关产品:
     
     产品编号  产品名称  规  格
     058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
     230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
     038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg
     
     
     
     "

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    相关实验
    • Western Blot 中的新技术、新仪器

      Stain Free 免染技术源于2002 年发表在《Analytical Biochemistry》上的一篇文章。文中指出聚丙烯酰胺中的蛋白可以进行快速检测。方法是将蛋白胶浸泡在三氯乙酸或氯仿中,然后通过紫外光照射。在三氯化合物存在时,紫外光会驱使色氨酸发生反应,产物会发出可见区内的光,从而实现蛋白条带在胶上的定位。Bio-Rad 公司利用了这项技术,并在其基础上进行了二次研发,开发出了Stain Free 免染技术。 Stain Free 免染技术主要包括两个部分:Stain Free

    • 【分享】一篇文献

      9]用RP-HPLC从人体胎盘中分离出40S核糖体蛋白。每一色谱组分都用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2DPAGE) N-端测序进行鉴别。N-端封闭的蛋白用内蛋白酶赖氨酸-C切割,然后对合适的肽段测序。用此法可对HPLC洗脱出的40S人体核糖体亚单元中所有蛋白进行鉴定。   ESI-MS用于短肽链高灵敏度测序,由于技术的困难,该法不能分析从凝胶中离析的蛋白质。Wilm等[10]介绍了一种从PAGE中离析的蛋白质进行测序的简便有效的方法纳克级电喷雾***质谱法。用此方法低至5 ng的蛋白都可被测序

    • 质谱生物分析中的应用

      与序列有关的肽图。合成的肽在110℃用3 mol.L-1 HCl处理5 min后,氨基酸从C-端和/或N-端释放出,其量足够用于验证肽的指认过程。-20℃时将多肽置全氟酰基酸酐中30~60 min,使分子从C-端顺序发生化学降解。测量C-端被截断的产物混合物的FABMS后,只需计算分子离子间的质量差,就可测出C-端序列。用LC/ESI-MS时,用新的Edman试剂,可将检出限降至nmol范围。Vladimirov等用RP-HPLC从人体胎盘中分离出40S核糖体蛋白。每一色谱组分都用二维聚丙烯酰胺

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