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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
细胞与组织裂解液(一氧hua氮检测用)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存,一年有效。
- 规格:
100ml
信裕生物的细胞与组织裂解液(一氧hau氮检测用)(Cell and Tissue Lysis Buffer for Nitric Oxide Assay)是一种专门用于或总一检测的细胞与组织裂解液。使用本裂解液裂解的样品,可以用于信裕生物生产的检测试剂盒(S0021)、总检测试剂盒(S0023和S0024)的检测。
本裂解液裂解获得的样品中包含了细胞或组织样品中的大部分蛋白,可以信裕生物生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度,并可以用于SDS-PAGE和Western印迹检测。需要注意的是本裂解液中不含蛋白酶和磷酸酯酶的抑制剂。本裂解液中添加蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂可能会干扰后续的检测。
本裂解液可以耐受反复冻融。
本裂解液如果用于培养于六孔板中一个孔的细胞的裂解,或者用于20mg组织的裂解液,约可以裂解500-1000个样品。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| XY-3090 | 细胞与组织裂解液(检测用) | 100ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 对于培养的细胞样品:
a. 融解细胞与组织裂解液(检测用),混匀备用。
b. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
c. 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
d. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的检或蛋白浓度测定等操作。样品制备后如果当日不能完成检测,可以-20℃保存,但仍宜尽快完成检测。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
2. 对于组织样品:
a. 融解细胞与组织裂解液(检测用),混匀备用。
b. 把组织剪切成细小的碎片。
c. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的样品,可以适当减少裂解液的用量。)
d. 用玻璃匀浆器或其它适当的匀浆设备匀浆,直至充分裂解。(如果组织样品本身非常细小,加入裂解液后可以直接通过强烈vortex使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆设备,缺点是不如使用匀浆设备那样裂解得比较充分。)
e. 充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的检或蛋白浓度测定等操作。样品制备后如果当日不能完成检测,可以-20℃保存,但仍宜尽快完成检测。
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文献和实验液)。③10000rpm,4℃离心10min,取上清转移至新管。④用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。⑤用裂解缓冲液将溶液浓度调到5mg/ml,每小瓶中放100μl,-80℃储存。⑥按照1:1体积比混合2×样品缓冲液,煮沸5min后,室温放置5min.⑦短时离心后点样电泳检测。B. 制备组织裂解液:①在制备过程中一直将溶胞液或组织放在冰上。②切开组织,称取组织1.5g于PBS中清洗。③在RIPA缓冲液中剪碎组织后,转移到匀浆器中,加足5ml RIPA缓冲液,研磨20min.④将研磨液转移到1.5ml的离心
小鼠 一氧化氮(NO ) 酶联免疫 分析 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中 一氧化氮(NO) 的含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 小鼠 一氧化氮(NO ) 水平。用纯化的 一氧化氮(NO ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 一氧化氮(NO ) ,再与HRP 标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体 - 抗原
等)中外泌体含量比较低,加了 ECS 液离心之后肉眼无法观察到沉淀,在重悬时使用 PBS 需要仔细吹打离心管壁四周和底部(避免剧烈吹打)。针对提取后的外泌体应先进行 NTA 粒径检测或 BCA 蛋白定量检测,再决定是否进行后继实验。 10、在纯化过程中,EPF 柱为什么会出现堵塞现象? 可能是因为细胞培养时间过长产生较多细胞碎片(样品离心预处理时不充分,仍有杂质残留)所致。若杂质残留较多(肉眼可见),请将上清液转移至新离心管,10,000 g,10 min离心 2-3 次至无明显沉淀,每次离心收集上清液
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