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- 2025年07月08日
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24
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详见说明书
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
>200次
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：DEAE-Dextran细胞转染试剂盒价格
英文名称：DEAE-Dextran Transfection Kit
产品规格：>200次
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种适合于把DNA转染到培养的真核细胞中的转染试剂盒。对于六孔板而言，一个包装的本转染试剂如使用常规方法可以转染2500个孔，如使用预处理方法可以转染200个孔。
试剂盒组分：
DEAE-Dextran溶液————20ml
10×PBS—————————20ml
氯喹溶液————————3.5ml
关于DEAE-dextran的细胞转染方法早在1968年就有相关论文发表。DEAE-de
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
偶氮荧光桃红，英文名或英文缩写：Azophloxine，级别：IND，规格：100克
0107D葡萄糖6钠盐ROBISON ESTER MONOwo7ium SALT
CamsylateD樟脑10磺酸25克BR，99%
1,2二肉豆蔻酰sn甘油3鳞酰醇安 ≥99%(20℃) 1,2DIMYRISTOYLSNGLYCqRO3PHOSPHOqTHcNOLcMINq 99807
3(N吗啉基)2羌基炳磺醋 (MOPSO) MOPSO 3999
FmocNMeValOHFmocN'甲基L缬酸100克特，98%
11051,4二录丁烷;二录四亚甲基1,4Dichlorobutane;DCB;Tetrametxylenedichloride
CARBENICILLIN,DIwo7iumSALT超级白色至米白色粉末COLDsigma
3典苄安言醋盐 97% 3Iodobqnzylcminq xy7nochloridq 2
AMPICILLIN,wo7iumSALT苄青霉素钠美国药典级白色至米白色结晶粉末COLDsigma
十五扶辛酸500毫克
2二棕榈酰0脂酰胆碱1,2DIHEXADECANOYLRACGLYCERO3PHOSPHOCHOLINE
2nepxtxelenecarboxylic acid, 1,2,3,4tetraxy7no8metxoxy2[[( 833
3吲哚 Indole3carbinol,≥.0% 700061 1G 多肽试剂
赖酸脱羧酶培养基shēng huà shì jì容量：100克
兔抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat islet cell aibody (ICA) ELISA Kit 大鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒
HumanBullousPemphigoid,BPELISAKit 人大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglucoprotein130,gp130ELISA试剂盒人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒规格：96T/48T
组织沉默调节蛋白1(SI1)活性
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒价格人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Rabbit Asymmeical Dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒 ，英文名： CACT ELISA Kit
PorcinesolubleVascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISA试剂盒猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒规格
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
注意事项：
DEAE-Dextran细胞转染试剂盒价格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验就是HEK293细胞系)。更高的转染效率是更高的病毒滴度的基本保障。 ViraPackTM 转染 试剂盒经Stratagene非常著名的MBS哺乳动物转染试剂盒改进而来，使用起来更为方便，推荐用于AdEasy® XL腺病毒载体系统，AAV(腺相关病毒)-无辅毒系统以及ViraPortTM反转录病毒系统，也可用于慢病毒载体。 ViraPackTM 病毒转染 试剂盒：货号#200488 试剂盒提供：2.5 M CaCl2, Solution，2x BBS (pH
基因转染是将具生物功能的核酸（RNA或DNA）转移或运送到细胞内，并使核酸在细胞内维持其生物功能的核酸转移技术。转染技术的目的是主要是研究真核基因的表达和调控，目前的方法包括磷酸钙共沉淀法，电穿孔法以及同DEAE-dextran或阳离子脂质体试剂形成复合物法。 在这些不同的方法中，DNA转导的效率，转导的机制，可重复性及使用的方便性都存在差异。而且，有效的DNA转导会伴随某些毒性或细胞抑制，其程度依赖于试剂、步骤和目的细胞的不同而不同，因此建议根据实际条件和实验条件，选择最佳
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
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