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- 2025年07月14日
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- 提供商：
艾柏森生物
- 服务名称：
FRET技术
| 步骤 | 服务内容 | 服务描述 |
| 1 | 实验方案制定 | 根据客户提供信息，进行风险评估等，制定实验方案。 |
| 2 | 细胞培养 | 根据实验培养特定的细胞用于转染，观察检测分子在细胞内的相互作用； |
| 3 | 细胞转染 | 构建质粒载体 CFP-A 和 YFP-B，将检测的 AB 蛋白分别偶联上荧光蛋白 CFP 和 YFP，并将两个质粒共转染到培养的细胞内 |
| 4 | 检测 FRET | 质粒载体 CFP-A 和 YFP-B 转染细胞 10h、12h、18h、24h、36h、48h、72h 后检测，是 否发生 Fret； |
| 5 | 图像采集 | 确定 FRET 配对的激发波长， 蓝光被调谐分别用于探测最大和最小的供体和受体信号， 最大供体信号和最小受体信号对应的波长用于收集双表达细胞的 FRET 信号。调整激光变化，以便获取最 大 CFP 信号和最小 YFP 信号的激发光波长，采集供体和受体图像，收集 FRET 信号。每个细胞 FRET 检 测重复 3 次，每种转染至少完成 6 个细胞的 FRET 检测 |
| 6 | 数据处理 | 去除 FRET 信号中 DSBT 和 ASBT 的光谱串色信号； 受体通路的 FRET 信号需要对 供体受体光谱灵敏度的变化进行矫正、对自发荧光和光学噪声进行矫正； 利用矫正系数对双标定细胞进行 象素匹配矫正 |
| 实验报告 | 上述各步骤详细实验结果；实验耗材等详细信息；可以为客户定制试验服务。 |
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【资源】杭州中肽-多肽-FRET 和TR-FRET Peptides
FRET (FluorescenceResonance Energy Transfer)荧光共振能量转移是距离依赖的dipole-dipole反应，能量从起始被激发的工体分子转移到受体分子不产生任何光子。 FRET多肽是标记着供体分子和受体分子（淬灭基团）的多肽。在大多情况下供体和受体对是两个不同的染料。如果受体分子是非荧光物质（淬灭基团）从荧光供体转移的能量被转变成分子共振。当FRET被终止时（将供体受体分开），可以检测到供体荧光增强。当供体和受体都是荧光物质时，被转移的能量以更长
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