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- 琼脂迁移实验
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
艾柏森生物
- 服务名称：
琼脂迁移实验
| 步骤 | 服务内容 | 服务描述 |
| 1 | 细胞系获取 | 客户自行提供；或我司代为制备 |
| 2 | 准备材料 | 将transwell小室放入培养板中；上室内添加上层培养液，下室内添加下层培养液 |
| 3 | 实验进行 | 将细胞种在上室内，由于膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 |
| 实验报告 | 分析实验结果；提供细胞系迁移/不迁移的原因；提供实验中的细节；可以根据需求定制服务。 |
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文献和实验1. 探针的标记：（1） 如下设置探针标记的反应体系：待标记探针 （1.75pmol/微升） 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10X） 1微升Nuclease-Free Water 5微升[γ-32P]ATP（3，000Ci/mmol at 10mCi/ml） 1微升T4 Polynucleotide Kinase （5-10u/微升） 1微升总体积 10微升按照上述反应体系依次加入各种试剂，加入同位素后，Vortex混匀，再加入T
凝胶迁移实验有称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验（EMSA，electrophoretic mobility shift assay），是一种用于蛋白与核算相互作用的技术。最初是用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验，也可应用与蛋白-DNA、蛋白-RNA互作研究。 一、实验原理 EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针，当核酸探针与样本蛋白混合孵育时，样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物；这种复合
1 .核蛋白的提取①用 细 胞 刮子刮取RAW264.7 细胞与VSMC ，移入2.5mlEP 管中。②将细胞用冰冷PBS 洗两遍，于4 ℃ , 5000g 离心3min ，沉淀细胞。③加5 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 洗细胞一次，于4 ℃ ,5000g 离心3 min 沉淀细胞.④加3 倍细胞体积的冰浴缓冲液A 悬浮细胞，冰上放置30min 、剧烈振荡10 次，4 ℃ ,5000g 离心15min ，去上清，沉淀为细胞核。⑤加与细胞等体积的冰浴缓冲液B ，充分混匀，冰上放置30min
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