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52
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Collagenase II
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详见说明书
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上海研生
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低温冷藏
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100mg
英文名称:Collagenase II
产品规格:100mg
发货周期:1~3天
本品为II型胶原酶,≥125U/mgsolid,可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。本品来源于溶组织梭菌(Clostridiumhistolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidaseA)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。
胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向
1)胶原酶I(TypeICollagenase)含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;
2)胶原酶II(TypeIICollagenase)含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;
3)胶原酶III(TypeIIICollagenase)含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;
4)胶原酶IV(TypeIVCollagenase)含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃,pH7.5的条件下,5h内水解胶原产生相当于1μML-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件4℃,有效期两年
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.胶原酶II型哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品:
3-羟己酯L-赖/L-赖/L-2,6-二己盐/L-Lysine acetate salt
1-萘酯L-鸟L-天冬盐/L-鸟L-天门冬盐/L-鸟-L-门冬盐/鸟门冬/ L-Ornithine L-aspartate salt
3-溴-5-L-精酯/L-精酯盐盐/L-Arginine ethyl ester dihydrochloride
2,3-二溴烯-1,4-二醇L-精L-谷盐/L-精-L-谷盐/精谷/L-谷L-精盐/L-Arginine L-glutamate salt
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4-异酯2-异/DL-α-异/2-/α-异/2-异酷/DL-2-/2-Aminoisobutyric Acid
1-苄啶-2-羧3-异/DL-3-异/DL-3-Aminoisobutyric acid
4,6-二-5-嘧啶3-/DL-3-正/DL-3-/DL-β-/DL-β-酪/3-Aminobutanoic acid
3-溴甘钙/甘钙螯合物/Calcium Glycinate
2--6-甘镁/甘镁螯合物/Magnesium Glycinate
胶原酶II型哪家好2,3,6,7,10,11六三亚(>98.0%(HPLC))英文名(EN)Xylenol Orange tetrasodium salt特价促销 规格(SP)10G
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2,3嗪二羧(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)Phytic acid dodecasodium salt hydrate特价促销 规格(SP)500G
2,3二(>98.0%(GC)(T))英文名(EN)Bicinchoninic acid disodium salt hydra...特价促销 规格(SP)1G
2,3二巯英文名(EN)Sodium metavanadate dihydrate特价促销 规格(SP)100G
2,3二巯英文名(EN)Rhodizonic acid sodium salt特价促销 规格(SP)5G
2',3'二脱鸟苷(ddG)英文名(EN)mCresol purple,90%特价促销 规格(SP)5G
2',3'二脱尿苷(ddU)英文名(EN)Diphenylaminesulfonic acid sodium salt特价促销 规格(SP)1G
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2,3二溴(98%)英文名(EN)Pyrosine B,90%特价促销 规格(SP)5G
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注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验主要存在于线粒体中的一类内含子,它的剪接位点类似于核编码结构基因的内含子,并同样遵从GT--AG规律。剪接机理同核内含子的剪接相似,也要形成一个套索的中间体,通过形成5'-2'磷酸二酯键将要剪接的位点靠近到一起。但是,II型内含子的剪接又不完全与核内含子的剪接相同,它具有自我剪接的功能,不需要剪接体和snRNA的参与,也不需要ATP供能。从结构上看,II型内含子的6个结构域可形成发夹环, 结构域5与6之间只间隔3个碱基,结构域6参与转酯作用。
小鼠II型胶原蛋白(Collagen II)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 小鼠II 型胶原蛋白 ( Collagen II )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗小鼠 Collagen II 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的
1、 目的 建立YB-II型澄明度检测仪使用、维护保养标准操作规程。规范对YB-II型澄明度检测仪的使用。2、适用范围 适用于YB-II型澄明度检测仪的使用和维护保养的操作。3、责任者 仪器操作人员和仪器管理人员。 4、内容 4.1. 规格及技术参数 电源:AC220v±10% ,50HZ。 灯管:22W。 照度范围:1000~4000LX。 时限范围:1~79S任意设定。 仪器重量:约12.5Kg。 外形尺寸:703mm×175mm×513mm
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