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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
3800
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：AO-EB双染色试剂盒哪家好
英文名称：Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit
产品规格：50ml*2|250ml*2
发货周期：1～3天
吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。
使用方法（仅供参考）
1、使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按11混合成工作液，现用现配。
2.1、对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS；如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后，用PBS洗2次，除去残余的荧光染料。加入新的PBS或培养基于荧光显微镜下观察即可。
2.2、对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后，离心去除工作液，后用PBS洗2次，除去残余的荧光染料。加入新的PBS或培养基于荧光显微镜下观察即可。
3、建议用蓝光激发，视野下可以观察到死细胞呈现红色，活细胞呈现绿色。
保存4℃避光密封保存，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
1-(4-氧羰)-2-L-异亮醇/(2S,3S)-2--3--1-醇/L-Isoleucinol
Obatoclax MesylateL-缬醇/(S)-2--3--1-醇/L-Valinol
2-溴-3--4-啶D-甘醇/R-甘醇/右旋甘醇/2-甘/(R)-(-)-2-醇/D-Phenylglycinol
2-溴-3--5-啶L-醇/(S)-2-醇/L-2--3--1-醇/L-Phenylalaninol
4,5,6,7-四吲唑褪黑素/N-酰-5-氧色/松果体素/褪色素/ Melatonin
己异酯N-酰-L-/N-Acetyl-L-phenylalanine
Cecropin BN-酰-L-谷/N-Acetyl-L-Glutamic acid
6-三尼古N-酰-L-亮/N-酰-L-白/N-酰-L-亮/N-Acetyl-L-Leucine
8-辛醇肌酯盐盐/N-酯盐盐/肌盐盐/Sarcosine ethyl ester HC1
酯L-别苏/(2S,3S)-2--3-羟/L-allo-Threonine
AO-EB双染色试剂盒哪家好1,4,5,6四,6二,3嗪二腈(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)NAcetylDLserine特价促销 规格(SP)1G
1,4,5,8四二亚(>97.0%(N))英文名(EN)NAcetylneuraminic acid,≥98%特价促销 规格(SP)10MG
1,4,7,10四环十二,4,7,10四三叔(>97.0%(T))英文名(EN)LPyroglutamic acid,特价促销 规格(SP)25G
1,4,7,10四环十二,4,7三三叔(>93.0%(N))英文名(EN)Phosphoramidon disodium salt特价促销 规格(SP)0.5MG
1,4,7,10四环十二四盐盐(>98.0%(N))英文名(EN)Hippuric acid,98%特价促销 规格(SP)5G
1,4,7三环壬(>98.0%(GC))英文名(EN)NαBenzoylLarginine ethyl ester hyd...特价促销 规格(SP)50G
1,4,7三环壬三盐盐(>98.0%(N)(T))英文名(EN)NαBenzoylLargininamide hydrochlori...特价促销 规格(SP)1G
1,4,7三,4,7三环壬(含稳定剂碳)英文名(EN)NαpTosylLarginine methyl ester hy...特价促销 规格(SP)1G
1,4,7三环壬(>98.0%(GC))英文名(EN)Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%)特价促销 规格(SP)5MG
1,4,8,11四环十四(>98.0%(T))英文名(EN)γAminobutyric acid,≥特价促销 规格(SP)25G
1,4,8,11四环十四,4,8,11四四(>97.0%(GC))英文名(EN)γLGlutamylαnaphthylamide特价促销 规格(SP)25MG
1,4,8,11四代环十四(>98.0%(GC))英文名(EN)LCarnosine,特价促销 规格(SP)1G
1,4,8,12四环十五(>97.0%(T))英文名(EN)SCarboxymethylLcysteine ,特价促销 规格(SP)1G
1,4,6双脱水甘露(>98%,BR)英文名(EN)NAcetylLGlutamine,≥98%特价促销 规格(SP)5G
1,4二(>98.0%(GC))英文名(EN)Creatine Monohydrate,≥98%特价促销 规格(SP)25G
1，4(BDO)(standard for GC,≥(GC))英文名(EN)Serotonin creatinine sulfate salt mono...特价促销 规格(SP)100MG
1,4二蒽醌(>90%,BS)英文名(EN)Iminodiacetic acid,98%特价促销 规格(SP)25G
1,4二(>98.0%(GC))英文名(EN)Perilloxin (HPLC,≥98%)特价促销 规格(SP)5MG
操作步骤(仅供参考)：
1、AO-EB双染色试剂盒哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：AO-EB双染色试剂盒哪家好
英文名称：Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit
产品规格：50ml*2|250ml*2
发货周期：1～3天
吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构；早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状；非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。
使用方法（仅供参考）
1、使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按11混合成工作液，现用现配。
2.1、对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS；如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后，用PBS洗2次，除去残余的荧光染料。加入新的PBS或培养基于荧光显微镜下观察即可。
2.2、对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后，离心去除工作液，后用PBS洗2次，除去残余的荧光染料。加入新的PBS或培养基于荧光显微镜下观察即可。
3、建议用蓝光激发，视野下可以观察到死细胞呈现红色，活细胞呈现绿色。
保存4℃避光密封保存，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
1-(4-氧羰)-2-L-异亮醇/(2S,3S)-2--3--1-醇/L-Isoleucinol
Obatoclax MesylateL-缬醇/(S)-2--3--1-醇/L-Valinol
2-溴-3--4-啶D-甘醇/R-甘醇/右旋甘醇/2-甘/(R)-(-)-2-醇/D-Phenylglycinol
2-溴-3--5-啶L-醇/(S)-2-醇/L-2--3--1-醇/L-Phenylalaninol
4,5,6,7-四吲唑褪黑素/N-酰-5-氧色/松果体素/褪色素/ Melatonin
己异酯N-酰-L-/N-Acetyl-L-phenylalanine
Cecropin BN-酰-L-谷/N-Acetyl-L-Glutamic acid
6-三尼古N-酰-L-亮/N-酰-L-白/N-酰-L-亮/N-Acetyl-L-Leucine
8-辛醇肌酯盐盐/N-酯盐盐/肌盐盐/Sarcosine ethyl ester HC1
酯L-别苏/(2S,3S)-2--3-羟/L-allo-Threonine
AO-EB双染色试剂盒哪家好1,4,5,6四,6二,3嗪二腈(>98.0%(HPLC)(T))英文名(EN)NAcetylDLserine特价促销 规格(SP)1G
1,4,5,8四二亚(>97.0%(N))英文名(EN)NAcetylneuraminic acid,≥98%特价促销 规格(SP)10MG
1,4,7,10四环十二,4,7,10四三叔(>97.0%(T))英文名(EN)LPyroglutamic acid,特价促销 规格(SP)25G
1,4,7,10四环十二,4,7三三叔(>93.0%(N))英文名(EN)Phosphoramidon disodium salt特价促销 规格(SP)0.5MG
1,4,7,10四环十二四盐盐(>98.0%(N))英文名(EN)Hippuric acid,98%特价促销 规格(SP)5G
1,4,7三环壬(>98.0%(GC))英文名(EN)NαBenzoylLarginine ethyl ester hyd...特价促销 规格(SP)50G
1,4,7三环壬三盐盐(>98.0%(N)(T))英文名(EN)NαBenzoylLargininamide hydrochlori...特价促销 规格(SP)1G
1,4,7三,4,7三环壬(含稳定剂碳)英文名(EN)NαpTosylLarginine methyl ester hy...特价促销 规格(SP)1G
1,4,7三环壬(>98.0%(GC))英文名(EN)Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%)特价促销 规格(SP)5MG
1,4,8,11四环十四(>98.0%(T))英文名(EN)γAminobutyric acid,≥特价促销 规格(SP)25G
1,4,8,11四环十四,4,8,11四四(>97.0%(GC))英文名(EN)γLGlutamylαnaphthylamide特价促销 规格(SP)25MG
1,4,8,11四代环十四(>98.0%(GC))英文名(EN)LCarnosine,特价促销 规格(SP)1G
1,4,8,12四环十五(>97.0%(T))英文名(EN)SCarboxymethylLcysteine ,特价促销 规格(SP)1G
1,4,6双脱水甘露(>98%,BR)英文名(EN)NAcetylLGlutamine,≥98%特价促销 规格(SP)5G
1,4二(>98.0%(GC))英文名(EN)Creatine Monohydrate,≥98%特价促销 规格(SP)25G
1，4(BDO)(standard for GC,≥(GC))英文名(EN)Serotonin creatinine sulfate salt mono...特价促销 规格(SP)100MG
1,4二蒽醌(>90%,BS)英文名(EN)Iminodiacetic acid,98%特价促销 规格(SP)25G
1,4二(>98.0%(GC))英文名(EN)Perilloxin (HPLC,≥98%)特价促销 规格(SP)5MG
操作步骤(仅供参考)：
1、AO-EB双染色试剂盒哪家好贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
环境的安全与洁净。该产品已通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，不会造成任何环境污染。 EB (溴化乙啶）是早期分子实验中常用的小分子核酸凝胶染色剂，但染色效果并不灵敏，背景荧光信号太强，分辨率不高。最重要的EB是一种高诱变性致癌的化学物质。 SYBR Green I和 SYBR Gold 也被厂家宣传为灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR
替代品。GelRed----真正安全无毒的核酸凝胶染料GelRed and Gelgreen 核酸凝胶染料最灵敏 , 最稳定的核酸凝胶染色试剂，是真正的EB替代产品！由美国BIOTIUM公司技术专家研发的GelRed 和GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定于一身的高效荧光核酸凝胶染色试剂。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。目前大多数商业化的核酸染料（凝胶染色试剂）总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意：EB (溴化乙啶）作为目前使用最广泛
的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解，稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR safe 虽然被认为安全，但它的染色灵敏度远远达不到标准。 Goldview从对比试验结果来看，该产品就是AO（丫啶橙，一种剧毒致癌产品，且荧光亮度不佳）。请看Goldview 与 AO 对比试验结果。 下面看一下实验结果： 结果一： 图一结果显示：采用同样的样品及电泳条件（点泳池中跑4块25
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