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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
Cell Counting Kit (CCK-8)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
1、CCK-8试剂盒价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：CCK-8试剂盒价格
英文名称：Cell Counting Kit (CCK-8)
产品规格：100T
发货周期：1～3天
CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
CellCountingKit简称CCK试剂盒，是一种基于WST-8（化学名2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值，间接反映活细胞数量。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
铌酸铵草酸盐水合物铅/铅/电解铅/Lead
三(2-啶基基)铅粒/铅/电解铅/Lead
2-铅箔/铅/Lead
2--6-羟基啶二茂铁/环二烯铁/双环二烯基铁/环二茂铁/Ferrocene
(3--4-吗啉-4-基)基酸苄酯钛铁试剂/邻二-3,5-二酸/钛铁试剂/试钛灵/Tiron
2-基-3-酰氧酸3-酸/化桂皮酸/化肉桂酸/β-酸/苄基酸/3-Phenylpropanoic acid
4-羟基-3--5-苄腈壬酸/风吕草酸/天竺葵酸/洋绣球酸/Nonanoic acid
1-基-3-啶酸酯肉豆蔻酸/十四酸/蔻酸/正十四碳酸/豆蔻酸/十四酸/Myristic acid
1-基-2-啶酸酯衣康酸/亚基琥珀酸/2-亚基二酸；分解乌头酸/叉琥珀酸/叉二酸/亚基二酸/Itaconic acid
1-基-4-啶酸酯DL-4-羟基-3-氧基扁桃酸/4-羟基-3-氧醇酸/4-羟基-3-氧基扁桃酸/3-氧基-4-羟基扁桃酸/ VMA
CCK-8试剂盒价格柱式病毒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgSALVIAEMILTI
经典法质粒DNA提取 规格HPLC≥98%;20mgMonomethyl lithospermate B
96孔板质粒DNAout(离心法) 规格HPLC≥98%;10mgDanshensu
96孔板质粒DNAout(真空法)（见关联产品） 规格HPLC≥98%;5mgSodium Danshensu
大提无内毒素质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgTanshinone I
大提无内毒素质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgTanshinone IIA
大提柱式Ti质粒DNAout（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgSulfotanshinone Sodium Injection
大提柱式质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgMiltirone
革氏阳性细菌质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgSalvianolic acid A
中提柱式BAC DNAout 规格HPLC≥98%;20mgSalvianolic acid B
柱式BAC DNAout 规格HPLC≥98%;20mgSalvianolic acid C
柱式Ti质粒DNAout（见关联产品） 规格HPLC≥98%;20mgSalvianolic acid D
柱式酵母质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgPaeonol
柱式无内毒素质粒DNAout 规格HPLC≥98%;20mgBilirubin
柱式质粒DNAout(50次) 规格HPLC≥98%;20mgSwertianolin
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文献和实验一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
在细胞培养实验过程中，大家是不是总会好奇别人家的实验总是做的又快又好，而自己做的实验又慢又难得做出自己满意的结果，搞得一天到晚也挺忙的，心想：我也很努力很认真啊，为啥效率总提不起来呢？其实，有时候并不是自己不努力，只是没有找对方法。做实验可不能光是埋头苦干，还要学会运用合适的检测试剂盒，这样就能事半功倍。如果你还在用 MTT，那就真的 OUT 了，MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时，CCK-8 可用于细胞增殖和毒性分析，同 MTT 法相比，CCK-8 即开即用
在生物江湖过了这么多年，懂行的人都知道检测细胞活性、凋亡、毒性方面有着各式各样的试剂和方法。而大都有预见性地肯定道CCK-8法是目前最具潜力和优势的细胞活性毒性检测方法。那为什么较早期传统的MTT法，CCK-8法会此被科研和药厂等相关实验人员看好呢？今天就这个方面来和大家做个交流，给点鄙人的见解。 不可否认，曾经MTT法的出现使各实验人员为之振奋。因为MTT法较当时其他细胞活性检测有不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测等优势，随即MTT势不可挡地成为细胞活性检测的主流方法。需知
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