Caspase 9分光光度法检测试剂盒价格

中文名称：Caspase 9分光光度法检测试剂盒价格
英文名称：Caspase-9 Colorimetric Assay Kit
产品规格：20T|50T|100T
发货周期：1～3天
本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-9检测。Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。Caspase-9是级联酶的上游分子，可被线粒体向细胞质释放的细胞色素C激活。激活的Caspase-9可引起下游级联酶的活性，如Caspase-3。Caspase-9在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段时则被激活。Caspase-9分光光度法检测试剂盒就是将caspase-9序列特异性的多肽偶联至发色基团，当该底物被caspase-9剪切后，发色基团即游离出来，可通过酶标仪或分光光度计（λ=405nm或400nm）测定其吸光值，可考察caspase-9的活化程度。
注意事项
1.Caspase-9Substrate避光保存及使用。
2.对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-9活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-9活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3.细胞数量需达到3～5×106个或新鲜组织50-100mg，以便能达到测定需要的100～200μg蛋白的要求，因为Caspase-9的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的OD值偏低，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．Caspase 9分光光度法检测试剂盒价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
以下是公司正在热销产品：
 N-苄氧羰基-L-苏氨酸苄酯2,2-联吡啶/α，α-联吡啶/2,2-联吡啶/α,α’-联氮杂/2,2-Dipyridyl
 3-硫基醇酸酯3-酰吡啶/基-3-吡啶基酮/3-酰基吡啶/3-Acetylpyridine
 3-基肉桂酸2-酰吡啶/基-2-吡啶基酮/1-(2-吡啶基)酮/2-酰基吡啶/2-Acetylpyridine
 N-苯基二胺硝苯吡啶/硝苯啶/硝基地平/1,4-二-2,6-二基-4-(2-硝基)-3,5-吡啶二羧酸二酯/硝苯地平/Nifedipine
 4,6-二烟腈4-二氨基吡啶/对二氨基吡啶/N,N-二基-4-吡啶胺/二氨基吡啶/DMAP
 (4-氧基吡啶-2-基)醇3-氨间氨/3-吡啶胺/3-氨基氮苯/β-氨/3-吡啶基胺/3-Aminopyridine
 3-苯酰肼2-吡啶/邻/α-氨啶/2-吡啶基胺/2-氨基/2-吡啶胺/α-氨基氮苯/2-Pyridinamine
 N-Boc-2-啶酸酯吡啶盐酸盐/盐酸吡啶/Pyridine hydrochloride
 2-氧基溴化镁环辛酮/Cyclooctanone
 4--2-氧酚双吡唑酮/双吡唑啉酮/双(1-苯基-3-基-5-吡唑啉酮)/4,4′-双(3-基-1-苯基吡唑啉-5-酮)/4,4′-双(1-苯基-3-基-5-吡唑啉酮)/3,3′-二基-1,1′-二苯基4,4′-双(2-吡唑啉)-5,5′-二酮/2,24,4-四-5,5-二基-2,2-二苯基-4,4-双-3H-吡唑-3,3-二酮/Bis-pyrazolone
Caspase 9分光光度法检测试剂盒价格Sodium succinate dibasic琥珀1克PH=4
Sodium stearate十八1克IPC，
Sodium stannate锡20毫克CP，98.5%
sodium SarcosineN-基基25克BR，
Sodium Salicylate柳500克CP
Sodium pyruvate焦葡萄50克99%
Sodium propionate盐250毫克BR
Sodium polyphosphate多聚偏磷100毫克GCS，99.5%
Sodium phosphotungstate十二钨磷水合物500克CP，
Sodium phosphomolybdate hydrate钼磷500克BR，95%
Sodium phosphite dibasic pentahydrate五水亚磷100克BR，95%
Sodium phosphate monobasic dihydrate磷一二水物25克CP，99%
Sodium phosphate dibasic dodecahydrate磷二25克99%
Sodium phosphate dibasic无水磷二500克97%
Sodium phenylpyruvate25克BR，90%
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。