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- 2025年12月26日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
江西江南纯生物试剂有限公司
- 库存：
95
- 适应物种：
人/植物/小鼠/大鼠/动物
避光使用小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒技术支持下显色反应更准确
这类反响的ELISA试剂盒定性作用可以用肉眼区别。目视标本也无色或近于无色者判为阴性，显色明晰者为阳性。
在ELSIA试剂盒中，正常人血清反响后常可出现呈色的本底，此本底的深浅因ELISA试剂盒的构成和试验的条件不一样而异，因而试验中有必要加测阴性对照。
阴性对照的构成应为不含受检物的正常血清或类似物（见3.6）。在用肉眼区别作用时，更宜用显色深于阴性对照作为标本阳性的政策。此刻酶催化无色的底物生成有色的产品。
反响的温度和时刻仍是影响显色的要素。在一定时刻内，阴性孔可坚持无色，而阳性孔则随时刻的延伸而呈色加强。
恰当前进温度有助于加快显色进行。ELISA试剂盒在定量测定中，参加底物后的反响温度和时刻应按规则力求。小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒技术支持定性测定的显色可在室温进行，
时刻通常不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的恰当缩短或延伸反响时刻，及时区别。
操作注意事项
1）从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2）实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3）小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒技术支持保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
4）预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
5）严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
6）所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验为广泛存在于真核细胞中的 Ca2 受体蛋白质（参见钙结合蛋白）。分子量 1.7万，具有与肌肉的肌钙蛋白 C相似的氨基酸顺序，对热稳定，等电点为 4.0， 1分子可与 4分子的 Ca2 结合，其解离常数约为 10-6 M。曾被发现作为环腺苷磷酸二酯酶的活化蛋白（垣内史朗等， 1970）。后来发现腺苷酸环化酶、磷酸化酶 b激酶、红细胞膜 Ca2 、 Mg2 － ATP酶、 NAD激酶、肌球蛋白 L链激酶等酶，都可在 Ca2 的存在下被其活化。关于活化的机制，认为
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腺素能信号传导在小鼠中，饮食诱导的产热由去甲肾上腺素刺激 β3-肾上腺素能受体（β3-AR）激活介导，从而导致腺苷酸环化酶激活，随后 cAMP 和 PKA 活性增加。为了检测 CPF 是否影响这条通路，研究者检测了 cAMP 对 β 受体激动剂—异丙肾上腺素的反应。在分离的棕色脂肪细胞中，观察到 cAMP 降低，导致其下游 HSL、p38MAPK 和 AMPK 的磷酸化和活化减少。这些数据提示 CPF 减少了棕色脂肪组织的 cAMP 和其下游信号，从而降低 UCP1 和控制线粒体功能的关键途径。图片来源
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