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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
54
- 英文名:
PG-4 (S+L-)
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 猫星形脑胶质细胞哪家好 |
| 种属 | PG-4 (S+L-) |
| 价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 猫星形脑胶质细胞
种属:PG-4 (S+L-)
类型:贴壁生长
形态:胶质、星形细胞样,CM5-1培养液中,贴壁,成纤维细胞样,长条形
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式菌株:未知
培养方法
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM5-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM5-1培养液。CM5-1培养液:90%Mc Coy’s 5a+10%FBS。Mc Coy’s 5a:Mc Coy’s 5a培养液。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
猫星形脑胶质细胞哪家好具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
实验材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
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猫星形脑胶质细胞哪家好产品规格:200ml
发货周期:1~3天
人淋巴细胞分离液采用优质原料科学配方配制而成。适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞。本品为无菌溶液。
储存条件:室温(18-25℃)避光保存。
开封后 2-8℃保存。
有效期:两年。
使用方法:
由于各离心机的性能差异以及实验室的温度不同,佳分离条件(离心转速、离心时间等)请根据实际摸索。
1.取新鲜抗凝血 1ml,与1ml Hank’s液混匀。
2.将以上液体小心加于 1ml的细胞分离液的液面上。
3.以 1500RPM离心15分钟。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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文献和实验正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:抗小鼠CD 11b/c抗体
对 Aβ 的识别与摄取。但在相同的时间内,小神经胶质细胞中光氧合 Aβ 的含量,总是低于天然 Aβ 的含量,这意味着 Aβ 的光氧合加速了 Aβ 在小神经胶质细胞中的降解,而不是识别。通过亮抑酶肽抑制蛋白酶的活性,几乎完全抑制了小神经胶质细胞对光氧合 Aβ 的加速清除作用。有趣的是,在星形胶质细胞中,作者没有观测到类似的清除现象。这些数据证明,是小神经胶质细胞对 Aβ 的降解效果因光氧合得到了提升,最终导致 A β 在脑中的聚集减少。 研究意义: 图片来源:Brain 该研究再次证明了使用光催化 Aβ
快速老化痴呆模型小白鼠SAMP8, SAMP10老化特征研究进展
学习记忆力障碍发生的时间时报道不一致,但一般均认为,与正常老化的R1相比,P8和P10在8月龄出现明显的学习记忆障碍,处于一种低紧张低恐怖的痴呆状态(P2、形态学特征⑴ 以脑干为中心出现海绵状变化P8在幼龄时其脑组织即出现海绵状变化,对照组R1小白鼠几乎见不到。如2月龄后以脑干、延髓的网状结构为中心,出现许多空泡性变化并呈海绵状。空泡定量分析表明,空泡的大小和数目伴衰老增加,且与学习记忆缺陷的程度密切相关。用胶质细胞纤维酸性蛋白 (GFAP) 染色,早期可见伴有大量的和广泛的星形
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