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- 文献和实验
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- 库存:
55
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
25管/12样
实验报告:
一、线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测试盒(可见分光光度法)哪家好分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测试盒(可见分光光度法)哪家好
英文名称:详见说明书
产品规格:25管/12样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
测定意义:
线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成,也可逆过程水解ATP。此外,复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。
测定原理:
复合体Ⅴ水解ATP产生ADP和Pi,通过测定Pi增加速率来测定复合体Ⅴ活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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OxybutyninHCl规格:含量测定MMP-2英文名称ZFP219细胞生长抑制蛋白22抗体(基化控制J蛋白)
Oxolinicacid规格:≥97%MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor)英文名称ZFP36L1G蛋白偶联受体39抗体
Oxiracetam规格:供检查用MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7)英文名称phospho-ZFP36L1(Ser334)桥尾蛋白抗体HPLC≥98%B淋巴细胞抗原检测试剂盒5mgHap
OxiconazoleNitrate规格:纯度>99%HPLC≥98%blca-4 ELISA试剂盒5mgCST1
OxiconazoleNitrate规格:HPLC法含量测定HPLC≥98%blca-1 ELISA试剂盒5mgHP
线粒体呼吸链复合体Ⅴ/ATP合酶/三磷酸腺苷合酶测试盒(可见分光光度法)哪家好DeltaFosB1,3-双(二基膦...
CD27 antigen化镍
Interleukin 38 antibody酰镍,二水
hypoxia-inducible factor 1β碳酸钴(II)
Polyclonal Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5草酸钴,二水
Na+ Taurocholate Cotransporting Polypeptide亚钴
DNA polymerase delta catalytic subunit环烷酸钴
tuftsin硝,六水
C-1-tetrahydrofolate synthase, cytoplasmic钴,七水
Proteasome subunit alpha type-3酸钴,四水
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
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5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
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1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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产品规格:25管/12样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
测定意义:
线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成,也可逆过程水解ATP。此外,复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。
测定原理:
复合体Ⅴ水解ATP产生ADP和Pi,通过测定Pi增加速率来测定复合体Ⅴ活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
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OxybutyninHCl规格:含量测定MMP-2英文名称ZFP219细胞生长抑制蛋白22抗体(基化控制J蛋白)
Oxolinicacid规格:≥97%MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor)英文名称ZFP36L1G蛋白偶联受体39抗体
Oxiracetam规格:供检查用MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7)英文名称phospho-ZFP36L1(Ser334)桥尾蛋白抗体HPLC≥98%B淋巴细胞抗原检测试剂盒5mgHap
OxiconazoleNitrate规格:纯度>99%HPLC≥98%blca-4 ELISA试剂盒5mgCST1
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Interleukin 38 antibody酰镍,二水
hypoxia-inducible factor 1β碳酸钴(II)
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Na+ Taurocholate Cotransporting Polypeptide亚钴
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tuftsin硝,六水
C-1-tetrahydrofolate synthase, cytoplasmic钴,七水
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1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验相关实验
自分泌生长因子,由肿瘤细胞产生的一种作用于它自己同种细胞的促分裂的生长因子。 Autocrine motility factor 自分泌生长因子,由肿瘤细胞分泌的一种蛋白质因子,能刺激同种细胞的移动(自发性移动)。 Autophosphorylation 自家磷酸化,由底物的酪氨酸激酶催化磷酸从ATP转移到其自身序列中的酪氨酸侧链的酚羟基,以作为下游底物的停靠位点。 Autosomal 常染色体的,指与任何除X和Y染色体
对73 个CF 病人的全部CFTR 突变的检出率为 100%[8]。另外还有一些研究结果表明 DHPLC 技术的突变检测准确率达到或接近100%。这些受检基因包括:X-连锁 眼白化病(OA1),威尔逊病(ATP7B),家族性腺瘤息肉病(APC),家族性癌 症综合征(PTEN, RET, VHL),常染色体显性多囊性肾病(PKD1, PKD2),血 友病A(因子Ⅷ),家族性高胆固醇血症(LDLR),黑色素瘤(INK4A),和退行 性非综合征式遗传性耳聋(GJB2)等。表1 中所罗列的是最近
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