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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
42
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100管/48样
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:NO含量测试盒(微量法)说明书
英文名称:详见说明书
产品规格:100管/48样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
测定意义:
NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:
NO在体内或水溶中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
NO含量测试盒(微量法)说明书待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Histoplasma capsulatum荚膜组织胞浆菌染料法荧光定量PCR试剂盒myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP)英文名称VEGFR3γ-谷氨酰基环转移酶抗体
Histoplasma capsulatum荚膜组织胞浆菌探针法荧光定量PCR试剂盒bovine Insulin protein 英文名称Vimentin生长分化因子8/肌肉抑制素抗体
Histoplasma farciminosum假皮疽组织胞浆菌PCR试剂盒PAR-2 AP (Protease-activated receptors-2 Activating polypeptide)英文名称VIP鹅细小病毒GPV抗体
Histoplasma farciminosum假皮疽组织胞浆菌染料法荧光定量PCR试剂盒Cygb (cytoglobin)英文名称PBEF1胃泌素/蛙皮素抗体
Histoplasma farciminosum假皮疽组织胞浆菌探针法荧光定量PCR试剂盒PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide)英文名称PBEF3-酸甘油脱酶(兔来源免疫组化用抗体)
Pectolinarin规格:HPLC≥98%,标准品DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformAlpha/ Beta)英文名称Vitronectin胶质细胞源性神经营养因子抗体
Pectolinarigenin规格:HPLC≥98%,标准品ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)英文名称VEGF-A β半乳糖苷酶抗体
Pectinase规格:3万U/gShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Ala22)英文名称VEGF-Bgamma酸B型受体1抗体HPLC≥98%NADPH酶3检测试剂盒250mgCMV-IgG
Pectin规格:半乳糖酸(干基计)≥74.0%PD-98059规格:>98%,MEK抑制剂GC≥99%NADPH酶1检测试剂盒250mgHHV-6
PD-184352(CI-1040)规格:>99%,MEK1/2抑制剂GC≥99%Na+/H+交换体3检测试剂盒250mgHHV-6 IgG
NO含量测试盒(微量法)说明书carboxyhemoglobin2,2′:6′,2′′-三...
Immunoglobulin alpha Fc receptor2-硫嘧
ADAMTS-131-基
Equol2-基
High Density Lipoprotein Paraoxonase 11-基基-2-醇
High Density Lipoprotein Serum Amyloid A6-基-2-硫代尿嘧
High Density Lipoprotein Apolipoprotein A11-酰
salivary cortisol三硫-吡复合物
carboxylated osteocalcin2,2,6,6-四基...
Soluble triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-24-叔基吡
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验人 Neuritin 酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本 中Neuritin 的含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 Neuritin 水平。用纯化的 Neuritin 抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入 Neuritin ,再与 HRP 标记的 Neuritin 抗体结合,形成抗体
度值A595为纵座标,作图,即得到一条标准曲线。由此标准曲线,根据测出的未知样品的A595值,即可查出未知样品的蛋白质含量。 0.5mg牛血清蛋白/ml溶液的A595约为0.50。 2.微量法 当样品中蛋白质浓度较稀时(10-100mg/ml),可将取样量(包括补加的水)加大到0.5ml或1.0ml,空白对照则分别为0.5ml或1.0ml H2O,考马斯亮蓝G-250试剂仍加5.0ml,同时作相应的标准曲线,测定595nm的光吸收值。 0.05mg牛血清蛋白/ml溶液的A595约为0.29。 六
1、原理 血样本中C3与抗C3血清在液相中反应,比例合适时形成可溶性免疫复合物。聚乙二醇(PEG6 000)可沉淀其免疫复合物,使溶液的透光率(T)下降。免疫复合物的量与C3和抗C3量呈函数关系,当固定抗C3浓度时,免疫复合物的形成量主要取决于样本中C3的含量,并与其呈正相关。故通过检测溶液吸光度值即可判定样本中C3含量。2、主要试剂(1)抗C3血清 有试剂出售,一般按说明书的效价使用,也可预先用方阵法滴定其效价。试验时按最适工作浓度稀释。(2)稀释液 PEG6000 10.00g,NaF
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