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碱性磷酸酶测定试剂盒(微板法)规格

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  • 上海研生
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  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      Alkaline phosphatase assay kit

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      详见说明书

    【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称:碱性磷酸酶测定试剂盒(微板法)规格
    英文名称:Alkaline phosphatase assay kit
    产品规格:96T|48T
    发货周期:1~3天
    发货周期:1~3天

    检测指标:碱性磷酸酶;ALP;AKP
    本试剂盒可测各种动物血清(浆)、组织、培养细胞、细胞培养上清等样本中碱性磷酸酶活性。碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉作用经铁化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。
    碱性磷酸酶AKP几乎存在于身体各种组织中,是膜结合酶。肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中AKP主要来源于肝和骨。AKP与肠内脂质转移及骨质钙化有关。血清AKP测定对肝胆系统及骨骼系统疾病的研究有参考意义。
    优点如下:
    1、快速简便:全程约40分钟,可测80例左右样本;
    5、回收试验: X =99%;
    2、取样量微:常规操作取样量50l, 酶标仪操作仅需5l即可测样本中的AKP活力;
    3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效;
    4、再现性好:变异系数CV=1.2%,20倍稀释线性仍然良好;
    5、回收试验: X =99%;
    6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;
    7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。
    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    Babesia canis犬巴贝斯虫染料法荧光定量PCR试剂盒UBE2E3英文名称phospho-c-Abl (Ser569)叉头相关转录因子3抗体

    Babesia canis犬巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒UBE2E2英文名称SAM68铁蛋白抗体
    Babesia divergens分歧巴贝斯虫PCR试剂盒UBE2D4英文名称SH3BGRL2FMS样酪氨酸激酶3配体抗体
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    Babesia divergens分歧巴贝斯虫探针法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥99%解整合素样金属蛋白酶12检测试剂盒20mgCA-2
    Ronidazole规格:>98.5%,BRHPLC≥98%解整合素样金属蛋白酶10检测试剂盒20mgCA-9
    Ronidazole规格:HPLC>98%,标准品BR,98%98%500mgYKL-40TabersonineAnti-CD304/Neuropilin-1神经纤毛蛋白-1抗体Anti-CD304/Neuropilin-1神经纤毛蛋白-1抗体48T/96THPLC≥98%解脲脲原体抗体检测试剂盒20mgCA Ⅵ
    BR,98%95%5gMSRB1GambogicacidAnti-Neuropilin-2神经纤毛蛋白-2抗体Anti-Neuropilin-2神经纤毛蛋白-2抗体48T/96THPLC≥95%睫状神经营养因子检测试剂盒20mgPC
    BR,90%95%25mgAFPCarabroneAnti-NRSF/REST神经元抑制蛋白抗体Anti-NRSF/REST神经元抑制蛋白抗体48T/96TBR,90%97%5mgAFP-L3SinensetinAnti-NSBP1核小体结合蛋白1抗体Anti-NSBP1核小体结合蛋白1抗体48T/96THPLC≥98%结核菌素检测试剂盒20mgGAG
    BR,98%97%100mgPGD2-MOXCepharanthineAnti-NSE神经元特异性烯醇化酶抗体Anti-NSE神经元特异性烯醇化酶抗体48T/96THPLC≥97%结核菌杆抗体IgM检测试剂盒100mgGHbA1c48T/96TELISAKitforGlycogenSynthaseKinase3Beta(GSK3b)胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE)
    碱性磷酸酶测定试剂盒(微板法)规格Dehydroepiandrosterone sulfate酰白藜芦醇

    CSGALNACT1多舌飞蓬苷
    heparan sulfate正基酞
    H2S白花前胡素
    epidemic parotitis野漆树苷
    Influenza viruses IgG槐果
    squamous cell carcinoma related antigen亚麻木酚素
    glypican 3异牡荆苷
    Phospholipase Cγ1醋戊曲酯
    Phospholipid transfer protein4-氧基
    操作步骤(仅供参考):
    1、碱性磷酸酶测定试剂盒(微板法)规格贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


     

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