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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 英文名:
Toal glutathione / Oxidized glutathione assay kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1、总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽测定试剂盒(分光光度法)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽测定试剂盒(分光光度法)规格
英文名称:Toal glutathione / Oxidized glutathione assay kit
产品规格:50管
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
检测指标:总谷胱甘肽;T-GSH;氧化型谷胱甘肽;GSSG
本试剂盒可测各种动物血清(浆)、组织、全血、红细胞等样本。谷胱甘肽在机体内的广泛分布和多功能性愈来愈引起科研工作者的注意。它在许多重要的生物体现象中起着直接或间接的作用,因而涉及到许多不同的研究课 题,如酶反应机理,蛋白质和DNA等大分子的生物合成、中间代谢、辐射、肿瘤、免疫、环境毒素和老化等。特别是近年来许多研究课题都涉及到细胞对活性氧和 自由基的防御作用。其中测定生物样品中,特别是血清(浆)中还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH和GSSG)含量变化,是机体氧化物牵累的重要指标。
优点如下:
1、快速简便:全程约40分钟,可测80例左右样本;
2、取样量微:常规操作取样量50l, 酶标仪操作仅需5l即可测样本中的ACP活力;
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效;
4、再现性好:变异系数CV=1.2%,20倍稀释线性仍然良好;
5、回收试验: X =96%;
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;
7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Avian Tenosynovitis Virus(ATV)禽腱鞘炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒48T/96TELISAKitforCellularRepressorOfE1AStimulatedGenes1(CREG1)M17琼脂
Avian Viral arthritis virus (AVAV)禽病毒性关节炎RT-PCR试剂盒48T/96TELISAKitforCellularRepressorOfE1AStimulatedGenes1(CREG1)M17肉汤ADAM28Lambda DNA/EcoRI+HindIII Marker25x50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)免疫试剂盒
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BR,90%95%25mgAFPCarabroneAnti-NRSF/REST神经元抑制蛋白抗体Anti-NRSF/REST神经元抑制蛋白抗体48T/96TADAMTS2Lambda Mix Marker5x50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫试剂盒
小鼠肾上腺髓质细胞ADAMTS8GeneRuler™ 100 bp DNA Ladder50 µg小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒
Rosiglitazonebase规格:>99.0%ADAMTS9GeneRuler™ 100 bp DNA Ladder5x50 µg小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)免疫试剂盒
Rosiglitazonebase规格:HPLC>98%,标准品UCP-2英文名称SIX2肿瘤/睾丸抗原112抗体
总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽测定试剂盒(分光光度法)规格Hapln1红花八角醇
Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor洋川芎内酯H
Granulocyte Colony Stimulating Factor枸橘苷
Leishimaria Ab欧夹竹桃苷
Cold-inducible RNA-binding protein滇乌头
cryoglobulin鹅去氧胆酸
TPS番泻苷C
ChemR23硫秋水仙苷
Steroid 5 Alpha Reductase 2黑芥子苷
rheumatoid factor川陈皮素
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文献和实验,500- 1000μl/瓶) ,刮落细胞,转移到Ep管。注意:冰上操作。 4.超声 10~15秒剪切DNA以减低样品粘性。 5.煮沸样品5 minutes。 6.离心12000g,5 min,取上清。 7.电泳分离:上样15μl~20μl 至 SDS-PAGE 胶 (10 cm x 10 cm)电泳。 如要定量检测某蛋白的表达水平, 应用RIPA裂解液(1 ml per 107 cells/100 mm dish/150cm2 flask)裂解
这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。Western使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。 仪器 :高压锅、玻璃匀浆器、高速离心机、分光光度仪、—20℃低温冰箱、垂直板电泳转移装置、恒温水浴摇床、多用脱色摇床。 试剂 :单
有色溶液对光线有选择性的吸收作用,不同物质由于其分子结构不同,对不同波长线的吸收能力也不同,因此,每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液,光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用,但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光谱来鉴定物质性质及含量的技术,其理论依据是(分光光度法)主要是指利用物质特有的Lambert和Beer定律。分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。比色法用的单色光是来自滤光片,谱带宽度从40-120nm,精度不高
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