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- 2025年07月10日
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YSRIBIO-C0018
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
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低温冷藏
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详见说明书
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格
英文名称：Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT
产品规格：100次
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种基于NBT的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。
本试剂盒采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法。通过黄嘌呤(Xanthine)及黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase)反应系统产生超氧阴离子(O2-.)，将氮蓝四唑还原为蓝色的甲臜(formazan)，后者在560nm处有强吸收。而SOD可清除超氧阴离子，从而抑制了甲臜的形成。反应液蓝色愈深，说明超氧化物岐化酶活性愈低，反之则酶活性愈高。据此通过比色分析就可以计算出超氧化物岐化酶活性水平。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。
储存条件：-20℃，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Flos chrysanthemi indici野菊花LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforRuntRelatedTranscriptionFactor2(RUNX2)Cary-Blair氏运送培养
Herba leonuri益母草LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforKallikrein7(KLK7)哥伦比亚血琼脂础
Semen coicis薏苡仁LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforHeatShock70kDaProtein5(HSPA5)亮绿糖培养
Radix stellariae银柴胡LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforReceptorActivityModifyingProtein2(RAMP2)肠道增肉汤(EE肉汤)
Herba artemisiae scopariae茵陈LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforScavengerReceptorClassBMember1(SCARB1)TTC营养琼脂142998-47-8AluI600 units猪去酰化饥饿激素(dGHRL)免疫试剂盒
SHES规格：>98.5%Shanzhisidemethylester规格：HPLC≥98%，标准品552-41-0AluI3000 units猪去(NE)免疫试剂盒
SGI-1776；SGI1776规格：>98%,Pim1抑制剂57-88-5Alw21I (BsiHKAI)500 units猪趋化因子配体28(CCL28)免疫试剂盒
SGI1027规格：>98%,DNMT抑制剂635-65-4Alw26I (BsmAI)1000 units猪氢化可的松(HYD)免疫试剂盒
Sevoflurane规格：供GC法检查用81-25-4Alw44I1000 units猪前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫试剂盒
SevelamerHCl规格：BR59-51-8BamHI4000 units猪前列腺素F2α(PGF2α)免疫试剂盒
总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格Klotho半齿泽兰素
Klotho长春新
KIT Ligand车叶草苷
Jo-1 Antibody野马追内酯A
N.Terminal Propeptide of type I Collagen丹参Ⅰ
β-CTX野菊花内酯
Collagen TypeⅠ知母皂苷B
IKKβ人参皂苷Rb3
IKKα紫花前胡苷
Collagen TypeII丹参素
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格
英文名称：Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT
产品规格：100次
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
本试剂盒是一种基于NBT的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。
本试剂盒采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法。通过黄嘌呤(Xanthine)及黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase)反应系统产生超氧阴离子(O2-.)，将氮蓝四唑还原为蓝色的甲臜(formazan)，后者在560nm处有强吸收。而SOD可清除超氧阴离子，从而抑制了甲臜的形成。反应液蓝色愈深，说明超氧化物岐化酶活性愈低，反之则酶活性愈高。据此通过比色分析就可以计算出超氧化物岐化酶活性水平。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。
储存条件：-20℃，有效期6个月。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Flos chrysanthemi indici野菊花LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforRuntRelatedTranscriptionFactor2(RUNX2)Cary-Blair氏运送培养
Herba leonuri益母草LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforKallikrein7(KLK7)哥伦比亚血琼脂础
Semen coicis薏苡仁LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforHeatShock70kDaProtein5(HSPA5)亮绿糖培养
Radix stellariae银柴胡LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforReceptorActivityModifyingProtein2(RAMP2)肠道增肉汤(EE肉汤)
Herba artemisiae scopariae茵陈LAMP鉴定试剂盒 48T/96TELISAKitforScavengerReceptorClassBMember1(SCARB1)TTC营养琼脂142998-47-8AluI600 units猪去酰化饥饿激素(dGHRL)免疫试剂盒
SHES规格：>98.5%Shanzhisidemethylester规格：HPLC≥98%，标准品552-41-0AluI3000 units猪去(NE)免疫试剂盒
SGI-1776；SGI1776规格：>98%,Pim1抑制剂57-88-5Alw21I (BsiHKAI)500 units猪趋化因子配体28(CCL28)免疫试剂盒
SGI1027规格：>98%,DNMT抑制剂635-65-4Alw26I (BsmAI)1000 units猪氢化可的松(HYD)免疫试剂盒
Sevoflurane规格：供GC法检查用81-25-4Alw44I1000 units猪前列腺素G/H合酶2(PTGS2)免疫试剂盒
SevelamerHCl规格：BR59-51-8BamHI4000 units猪前列腺素F2α(PGF2α)免疫试剂盒
总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)规格Klotho半齿泽兰素
Klotho长春新
KIT Ligand车叶草苷
Jo-1 Antibody野马追内酯A
N.Terminal Propeptide of type I Collagen丹参Ⅰ
β-CTX野菊花内酯
Collagen TypeⅠ知母皂苷B
IKKβ人参皂苷Rb3
IKKα紫花前胡苷
Collagen TypeII丹参素
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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