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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
Lipid Peroxidation MDA Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1、脂质氧化水平检测试剂盒(MDA试剂盒)(丙二醛检测盒)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:脂质氧化水平检测试剂盒(MDA试剂盒)(丙二醛检测盒)规格
英文名称:Lipid Peroxidation MDA Assay Kit
产品规格:100次
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
本试剂盒采用一种基于MDA和硫代酸反应产生红色产物的显色反应,随后通过比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测,广泛用于脂质氧化水平检测的试剂盒。本试剂盒可以检测低达1μM的MDA。血浆、血清样品中的MDA含量通常在约2-4μM,尿液中的MDA含量通常在约5-30μM,在本试剂盒的检测范围内,可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。本试剂盒共可进行100次检测。
试剂盒组分:
TBA——————————25mg
TBA配制液———————5ml
TBA稀释液———————15ml
本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂,可以有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA,使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使对脂质氧化的测定更加准确。
抗氧化剂————————300μl
标准品(1mM)——————200μl
丙二醛是一种生物体脂质氧化的天然产物。动物或植物细胞发生氧化应激时,会发生脂质氧化。一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括MDA。此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平,因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA,例如thromboxane synthase也可以催化产生,但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。
本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂,可以有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA,使检测更加准确。同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使对脂质氧化的测定更加准确。
注意事项:醛、较高浓度的可溶性糖(例如250mM蔗糖)对反应有干扰,可溶性糖与TBA显色反应的产物在532nm也有吸收(最大吸收在450nm)。如果可溶性糖对测定有干扰,可以通过测定450nm作为参考波长进行双波长测定,消除其干扰。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Radix polygoni multiflori preparata制何首乌LAMP鉴定试剂盒 TIFA英文名称RING finger protein 189眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
Radix astragali preparata炙黄芪LAMP鉴定试剂盒 TOM1L1英文名称RNF144BEYA4蛋白抗体
Rhizoma anemarrhenae知母LAMP鉴定试剂盒 TRAF6BP英文名称RBM20血清反应因子辅助蛋白1抗体
Fructus aurantii immaturus枳实LAMP鉴定试剂盒 TLE4英文名称RNF215吞噬细胞运动蛋白2抗体
Fructus gardeniae栀子LAMP鉴定试剂盒 LAT英文名称RNF187红细胞膜条带4.1蛋白抗体
Sevelamercarbonate规格:BR;BindingofPhosphate4.0~7.0mmo1/gTAZ英文名称Phospho-Ret (Tyr1062)酸化红细胞生成素受体抗体
Sesamoside规格:HPLC≥98%,标准品Thrombin light chain英文名称RANKL转录调节因子E2F7抗体HPLC≥98%抗尾状核检测试剂盒20mgFXIAg
Sesamolin规格:HPLC≥98%,标准品HPLC≥98%抗网硬蛋白抗体检测试剂盒20mgBSA
Sesamol规格:>98%,BCHPLC≥98%抗外切酶体复合物成分RRP45检测试剂盒20mgUBC
Sesamin规格:HPLC≥98%,BRSesamin规格:HPLC≥98%,标准品HPLC≥95%抗外切酶体成分10检测试剂盒20mgBLCA-4
脂质氧化水平检测试剂盒(MDA试剂盒)(丙二醛检测盒)规格RNA binding motif protein 6海藻糖
Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 5格列喹
Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2富马酸
Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 14-氧基水杨酸
P-Selectin;CD62P;GMP140短葶山麦冬皂苷C
Substance P Receptor七叶胆苷XVII
Substance P扁柏双黄
permeability glycoprotein高车前苷
PTEN;MMAC1叶黄制菌素
181P-tau藏红花酸
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