
流式细胞检测
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- 江苏南京
- 2025年07月14日
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BOSGENE
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流式细胞检测
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流式细胞术(flowcytometry, FCM)是一项新型的 、发展迅速的生物医学分析技术,它是集激光技术 、光电测量技术、计算机技术、 流体力学以及细胞免疫荧光化学技术 、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。 流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。它使细胞或微粒在液流中流动,逐个通过一入射光束,并用高灵敏度检测器记录下散射光及各种荧光信号,从而得以对粒子进行多参数分析,包括诸如粒子形状和大小、 细胞周期、 细胞内细胞因子、细菌表面抗原、细胞DNA内含物等。FCM检测的粒子一般为活性细胞,通过激光光源激发细胞上所标记的荧光物质的强度和颜色以及散射光的强度可以得到细胞内部各种各样的生物信息。另外FCM还可进行细胞分选,可以根据所检测细胞的某种性质进行分选,并且如果分选的过程是在无菌条件下进行的,这些细胞还可以用来培养。
博世鑫生物拥有多台流式细胞仪,具有丰富的流式检测经验,从单色荧光标记到多色荧光标记,从凋亡、周期到MPTP、CFSE等,从流式分析到流式分选,可为您提供全面的流式检测服务。
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文献和实验#01 什么是同型对照? 同型对照(Isotype Control),是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度,但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照? 流式抗体与靶标的结合,是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞(除T细胞外)表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体,这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合,出现非特异
大部分老师做流式实验时,会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等,用到 FMO 对照的比较少。尽管如此,FMO 对照在设置圈门时仍具有重要的参考价值。 一方面,FMO 对照有助于精确地设置阴阳性群体界限。我们在做多色实验时,可能会出现某些通道信号难以区分的情况,主要是因为其他某个荧光对该通道的干扰很大。FMO 对照(Fluorescence Minus One,荧光扣除一)减少了其中一个通道的荧光抗体,能够帮助衡量其它通道的荧光漏溢情况。 如下图所示,PerCP/Cyanine
或者碱化等方法将 1% 的多聚甲醛溶于 PBS 或者蒸馏水中,但是,多聚甲醛一旦溶解形成溶液,它实际上就是甲醛溶液。 3.细胞是用 FACS 检测的 错误 1:FACS 是 Fluorescence Activated Cell Sorter的首字母缩写词,是荧光激活细胞分选仪,而检测细胞用到的是分析仪,而非分选仪。流式细胞仪应该是 Flow Cytometry,简写为 FCM。 错误 2:FACS 是 Becton Dickinson 的商品名,因此所有 FACS 都是流式细胞仪,但并非所有的流式
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