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- 292-81101
- 2026年01月30日
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生物制药残留DNA提取试剂盒（碘化钠法）
残留DNA提取试剂盒遵照中国药典记载的碘化钠法，适用于疫苗和治疗用生物制品所含宿主细胞残余DNA的提取。
残留DNA提取试剂盒可以提取样品中含有的极微量的DNA，回收率较高。DNA的提取操作时间为60-90 min。提取的DNA可以通过qPCR进行定量。
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◆特点
● 高回收率回收微量DNA（100-1,000 fg）
● 无需更换试管（全程仅使用1根试管）
● 整个提取过程仅需60-90 min
● 提供高浓度蛋白样品的前处理实验方案
● 回收后的DNA可通过qPCR、Threshold Assay(Molecular Devices)进行定量
● 采用碘化钠法
◆原理
1. 使样品中的蛋白质和脂质溶于碘化钠和月桂酰肌氨酸钠；
2. 异丙醇与糖原选择性地共沉淀DNA。
◆标准步骤
◆应用实例
DNA spiking test（加标回收实验）
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DNA Extractor™ Kit可以高产量提取残留DNA，甚至少量残留DNA。
◆抗体药物适用性研究
从高蛋白溶液中提取DNA
使用不同浓度的IgG溶液检测CHO来源DNA的加标回收率。
方法
1） 向不同浓度的IgG溶液(10-100 mg/mL)中添加2 pg/mL CHO来源DNA。
2） 按照本产品说明书记载的实验方案提取DNA。
● 提取实验方案：Protocol#2
● 样品前处理：蛋白浓度超过2 mg/mL时实施的前处理方案（Proteinase K处理）
3） 通过qPCR法计算提取的CHO来源DNA的回收率。
结果
不同蛋白浓度溶液的Cq值
| Sample |
Input |
蛋白浓度 (mg/mL) |
|||||
| 10 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
||
| Cq |
31.596 |
31.566 |
31.351 |
31.726 |
31.502 |
31.282 |
31.658 |
| 31.599 |
31.608 |
31.774 |
31.787 |
－ |
31.485 |
31.66 |
|
| 31.338 |
31.861 |
31.5 |
31.85 |
31.56 |
31.369 |
－ |
|
| Average Cq |
31.511 |
31.678 |
31.542 |
31.788 |
31.531 |
31.379 |
31.659 |
| Difference of Cq |
0 |
-0.167 |
0.136 |
-0.246 |
0.257 |
0.152 |
-0.28 |
| Power |
1 |
0.891 |
1.099 |
0.843 |
1.195 |
1.111 |
0.824 |
| Recovery Rate (%) |
100 |
89.1 |
109.9 |
84.3 |
119.5 |
111.1 |
82.4 |
不同蛋白浓度溶液的CHO来源DNA回收率
结果显示，即使蛋白浓度高达100 mg/mL，也能高回收率提取CHO来源DNA。
从抗体药物模拟溶液中提取 DNA
检测抗体药物常用的Buffer及添加剂制备的IgG溶液中的 CHO来源DNA的加标回收率。
方法
1） 向抗体药物中常用的Buffer组成（表1.①-⑥）及添加剂溶液中添加20 mg/mL的IgG蛋白，制备不同的抗体药物模拟溶液。向不同溶液中添加
1） 20 pg/mL CHO来源DNA。
2） 根据本产品说明书记载的实验方案提取DNA。
● 提取实验方案：Protocol#2
● 样品前处理：蛋白浓度超过2 mg/mL时实施的前处理方案（Proteinase K处理）
3） 通过qPCR法计算提取的CHO来源DNA的回收率。
表1 Buffer组成
| No. |
Buffer组成 |
| ① |
10 mM PB pH 6.0, 0.15 M NaCl, 2 mM EDTA |
| ② |
10 mM PB pH 7.4, 0.15 M NaCl, 2 mM EDTA |
| ③ |
50 mM NaOAc pH 5.2, 0.15 M NaCl, 2 mM EDTA |
| ④ |
10 mM PB pH 6.0, 2 mM EDTA |
| ⑤ |
10 mM PB pH 7.4, 2 mM EDTA |
| ⑥ |
50 mM NaOAc pH 5.2, 2 mM EDTA |
表2 添加剂溶液
Buffer: 10 mM PB pH 6.0, 0.15 M NaCl, 2 mM EDTA
| No. |
添加剂（浓度） |
| ① |
Sucrose (10 w/v%) |
| ② |
Trehalose Dihydrate (10 w/v%) |
| ③ |
D(-)-Mannitol (10 w/v%) |
| ④ |
D(-)-Sorbitol (10 w/v%) |
| ⑤ |
D(+)-Maltose Monohydrate (10 w/v%) |
| ⑥ |
L(+)-Arginine Hydrochloride (1 w/v%) |
| ⑦ |
L‐Histidine (1 w/v%) |
| ⑧ |
Glycine (1 w/v%) |
| ⑨ |
Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monooleate (Tween80) (0.5 v/v%) |
| ⑩ |
Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monolaurate (Tween20) (0.5 v/v%) |
结果
不同Buffer的Cq值
| Sample | Input | Buffer | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | ||
| Cq | 31.473 | 31.693 | 31.544 | 31.218 | 31.058 | 31.595 | 31.181 |
| 31.364 | 31.196 | 30.973 | 31.568 | 31.085 | 31.343 | 31.112 | |
| 31.045 | 31.53 | 31.787 | 31.315 | 30.942 | 31.452 | 31.558 | |
| Average Cq | 31.294 | 31.473 | 31.435 | 31.367 | 31.028 | 31.463 | 31.284 |
| Difference of Cq | 0 | -0.179 | -0.141 | -0.073 | 0.266 | -0.169 | 0.01 |
| Power | 1 | 0.883 | 0.907 | 0.951 | 1.203 | 0.89 | 1.007 |
| Recovery Rate (%) | 100 | 88.3 | 90.7 | 95.1 | 120.3 | 89 | 100.7 |
不同Buffer的CHO来源DNA回收率
不同添加剂溶液的Cq值
| Sample |
Input |
添加剂溶液 |
|||||||||
| ① |
② |
③ |
④ |
⑤ |
⑥ |
⑦ |
⑧ |
⑨ |
⑩ |
||
| Cq |
31.473 |
31.826 |
31.327 |
30.907 |
31.143 |
31.071 |
31.525 |
－ |
31.525 |
31.013 |
31.086 |
| 31.364 |
31.194 |
30.991 |
31.759 |
31.103 |
31.279 |
31.068 |
31.442 |
31.203 |
31.34 |
30.87 |
|
| 31.045 |
30.703 |
－ |
31.009 |
－ |
30.978 |
31.225 |
31.479 |
30.757 |
31.02 |
31.02 |
|
| Average Cq |
31.294 |
31.241 |
31.159 |
31.225 |
31.123 |
31.109 |
31.273 |
31.461 |
31.162 |
31.124 |
30.992 |
| Difference of Cq |
0 |
0.053 |
0.135 |
0.069 |
0.171 |
0.185 |
0.021 |
-0.167 |
0.132 |
0.17 |
0.302 |
| Power |
1 |
1.037 |
1.098 |
1.049 |
1.126 |
1.137 |
1.015 |
0.891 |
1.096 |
1.125 |
1.233 |
| Recovery Rate (%) |
100 |
103.7 |
109.8 |
104.9 |
112.6 |
113.7 |
101.5 |
89.1 |
109.6 |
112.5 |
123.3 |
不同添加物溶液的CHO来源DNA回收率
结果显示，即使含有不同Buffer组成和添加剂的IgG溶液也能高回收率提取CHO来源DNA。
◆试剂盒构成
| 产品编号 |
内容物 |
内容量 |
| 299-81111 |
碘化钠溶液, CP |
26 mL |
| 296-81121 |
月桂酰肌氨酸钠, CP |
1.2 mL |
| 293-81131 |
洗净液A, CP |
42 mL |
| 290-81141 |
洗净液B, CP |
40 mL×2 |
| 297-81151 |
糖原溶液, CP |
0.1 mL |
备注：每种成分不单独出售
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
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◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 292-81101 | 残留DNA提取试剂盒（碘化钠法） DNA Extractor™ Kit for Residual DNA, CP Method (Sodium Iodide Method) |
50 tests |
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1、科学研究（1）药物研究开发，如新药筛选，疫苗、基因工程药物、细胞工程、药物研究与开发、单克隆抗体制备等。（2）基础研究，如药物作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。2、生物制药（1）疫苗生产：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫苗（肿瘤疫苗)等。（2）基因工程药物生产：如EPO等。（3）抗体药物、基因治疗药物生产。（4）细胞工程药物生产：生物细胞内的一些生物活性多肽，生物活性物质等。（5）利用细胞法体外测定生物活性物质的活性；并预测其在体内的药效和替代体内法检测其成品的生物活性。
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