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文献和实验样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂,使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆,加入裂解液若粘稠至不能有效分层,可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit(货号:74104)提取时,可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%,能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少;由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差,有降解;污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA,以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
在极其干燥的环境而引起。在要干燥的溶液中加入适当的溶质来防止蛋白质变性是一种非常有效的保持蛋白质稳定的方法。这些溶质的特点是都具有亲水基团,这些基团通过掩盖疏水性氨基酸从而达到稳定蛋白质功能构造的作用。因此,由于在干燥时溶剂的去除会促进蛋白与蛋白,尤其是蛋白与固相表面的相互作用,所以在干燥前加入稳定剂非常重要。商品化稳定剂的使用商品化稳定剂同样适用于保质期的优化。在一个实验中,96孔聚苯乙烯板(Immulon 2; Dynex Technologies Inc.; Chantilly, VA)上包
到管壁而损失。 BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶 在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA
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