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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
Semen sesami nigrum
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
| 产品名称 | 黑芝麻LAMP鉴定试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Semen sesami nigrum |
| 货号 | BHP20889 |
特点优势:
特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
6-羟基香豆素 6-Hydroxycoumarin 质量规格:>98%(GC);进分 人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA检测试剂盒Humanlipidperoxlde,LPOELISAKit 96T/48T
甘氨石胆酸(GLCA) Lithocholylglycine 质量规格:美国原装进口 大鼠锌金属硫蛋白(Zn-MT)试剂盒 Rat Zn-Metallothionein,Zn-MT ELISA Kit
匹卡米隆 Pikamilone 质量规格:>98%,BR 英文名称RatniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠合成酶(NOS)规格:96T/48T
双乙酸钠 Sodium diacetate 质量规格:>99% 寡核苷酸探针非同位素AP化学发光法RNA北方杂交完全试剂盒5
L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物 Glycyl-L-glutamine monohydrate 质量规格:>99%,BR ELISAKitICA人胰岛细胞抗体规格:48T/96T
瑞格非尼 Regorafenib(BAY 73-4506) 质量规格:>99%,多激酶抑制剂 小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒 ,英文名: Methylase ELISA Kit
MK-2866 Ostarine,GTx-024 质量规格:>99% 大鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA检测试剂盒RatVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 96T/48T
XTT钠盐 XTT sodium salt 质量规格:>90%,进分 人程序性死亡因子配体1(PD-L1/CD274)试剂盒 Human PD-L1 ELISA Kit
二氢猕猴桃内酯,奇异果内酯(标准品) (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone 质量规格:HPLC>98%,标准品 RatsolubleVascuolarcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢猕猴桃内酯,奇异果内酯 (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone 质量规格:>99%,AR IOV膜性囊泡高质化试剂盒10
短叶老鹤草素 A HPLC≥98% 5mg Plagrowthhormone,GHELISA试剂盒植物生长激素(GH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
短叶松素 HPLC≥98% 5mg Plahormoneabscisicacid,ABAELISA试剂盒植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鹅掌揪内酯 HPLC≥98% 5mg PlaHumanVitaminC,VCELISA试剂盒植物维生素C(VC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
恩镰孢菌素B HPLC≥98% 5mg PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISA试剂盒植物吲哚乙酸(IAA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二羟丙茶碱A HPLC≥98% 5mg Plaphosphatidicacid,PAELISA试剂盒植物凝脂酸(PA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二羟丙茶碱B(细胞) HPLC≥98% 5mg Plaphosphatidylglycerol,PGELISA试剂盒植物0脂酰甘油(PG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢赤松素 HPLC≥98% 5mg PlaVitaminA,VAELISA试剂盒植物维生素A(VA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢尼洛替星 HPLC≥98% 5mg PlaVitaminB12,VB12ELISA试剂盒植物维生素B12(VB12)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢桑色素 HPLC≥98% 5mg PlaVitaminB6,VB6ELISA试剂盒植物维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二氢愈创木脂酸 HPLC≥98% 5mg PlaVitaminD,VDELISA试剂盒植物维生素D(VD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
黑芝麻LAMP鉴定试剂盒说明书PlaGibberellicAcid,GAELISA试剂盒植物赤霉素(GA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 杜鹃醇 HPLC≥98% 5mg
Plagrowthhormone,GHELISA试剂盒植物生长激素(GH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 短叶老鹤草素 A HPLC≥98% 5mg
Plahormoneabscisicacid,ABAELISA试剂盒植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 短叶松素 HPLC≥98% 5mg
PlaHumanVitaminC,VCELISA试剂盒植物维生素C(VC)ELISA试剂盒规格:96T/48T 鹅掌揪内酯 HPLC≥98% 5mg
PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISA试剂盒植物吲哚乙酸(IAA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 恩镰孢菌素B HPLC≥98% 5mg
Plaphosphatidicacid,PAELISA试剂盒植物凝脂酸(PA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二羟丙茶碱A HPLC≥98% 5mg
Plaphosphatidylglycerol,PGELISA试剂盒植物0脂酰甘油(PG)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二羟丙茶碱B(细胞) HPLC≥98% 5mg
PlaVitaminA,VAELISA试剂盒植物维生素A(VA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢赤松素 HPLC≥98% 5mg
PlaVitaminB12,VB12ELISA试剂盒植物维生素B12(VB12)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢尼洛替星 HPLC≥98% 5mg
PlaVitaminB6,VB6ELISA试剂盒植物维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格:96T/48T 二氢桑色素 HPLC≥98% 5mg
操作流程:
1. 黑芝麻LAMP鉴定试剂盒说明书整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃
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文献和实验长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
诊断中是不需要特殊仪器的,但临床使用的成品试剂盒有赖于和国内拥有毒株的老师合作开发针对中国国情的疾病LAMP引物,在研发过程中由于涉及引物的选择,引物浓度的调整,及反应温度和时间的优化,需要用一种量化的方式去帮助研究者分析选择数据,因此我们推荐用荣研公司的专利产品LA-320C实时基因扩增仪。 3. 操作的便捷性 LAMP方法较其他基因诊断方法,其最大的优势就在于操作的简便性及对仪器设备和人员要求低。LAMP操作步骤少,只需按照说明书要求将反应液、酶、引物和模板按照规定的量加入PCR
按照TaKaRa的说明书,我用了Cool Start法,就是所有操作和试剂都是放在冰上进行的,据说能够减少非特异性。我当时担心目的基因量不够,所以P了两管,分到四个孔跑胶回收的。胶回收用的是OMEGA的试剂盒。 切胶回收之后测得目的片段浓度大概为20 ng/ul。按照TaKaRa的pMD18T说明书的要求,pMD18T需要加入1 ul,而目的片段需要0.1 pmol-0.3 pmol,换算一下,需要的目的片段的量大概为0.1*1800*325=58500 pg=58.5 ng到0.3*1800
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