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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 英文名:
M5 HiPure ROX II Reference Dye(50X) ROX II 参比染料
- 库存:
125
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
40ul/200ul
| 规格: | 40ul | 产品价格: | ¥247.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ul | 产品价格: | ¥872.0 |
告诉你M5 HiPure ROX II Reference Dye(50X) ROX II 参比染料实验时您应该注意:
1、试剂不能与手接触。
2、试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处。
3、已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。
4、要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。
5、取完一种试剂后,应将工具洗净、擦干后,方可取用另一种试剂。
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文献和实验MasterMix,模板和引物的不同进行优化,达到一个最佳反应体系。在反应体系配置过程中,有下面几点需要注意:1. MasterMix不要反复冻融,如果经常使用,最好溶解后放在4度。2. 更多的配制Mix进行,减少加样误差。最好能在冰上操作。3. 每管或每孔都要换新枪头!不要连续用同一个枪头加样!4. 所有成分加完后,离心去除气泡。5. 每个样品至少3个平行孔。参比或者校正染料(reference dye,passive dye)常用的是ROXTM(现在已经是ABI的注册商标了!)或者其他染料,只要不影响检测
the dye to use as the passive reference,也就是设置我们反应体系是否含有参比荧光。这里需要根据实际情况进行选择,不正确的定义参比荧光同样会导致最终结果的异常。例如图 7 中实验采用染料法进行相对定量分析,但是结果中的扩增曲线异常(图 7A),排查多组分图时发现 SYBR 在扩增循环过程中荧光信号变化正常,但是细致来看作为参比荧光的 ROX 信号却在整个反应过程中信号接近于零(图 7B)。我们知道扩增图谱纵坐标 ΔRn 的数值是报告基团荧光信号和参比荧光信号的比值
「Undetermined」(图 11A),但看多组分图时发现报告荧光有正常的扩增曲线,而 ROX 的荧光值却在 0 的位置(图 11B)。显然,这是使用了一种不含 ROX 的试剂,但未取消 ROX 分析导致的。这个数据只要在分析设置中将 Passive reference dye 从默认的 ROX 改成 None,再重新分析就可以得到正常的结果。 图 11 未加 ROX 导致扩增曲线异常 案例 8: 再来看一个相对少见一点的案例。在这个案例里,也是只有杂乱的扩增曲线,无法获得 CT 值(图 12A)。而查看多组分图
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