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Delafield苏木素染色液

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  • G4500
  • 北京
  • 2025年07月15日
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    • 保质期

      1年

    • 供应商

      北京索莱宝科技有限公司

    • 保存条件

      室温,避光

    • 规格

      100ml

    Delafield苏木素染色液 
    货号G4500
    规格100mL
    保存:室温避光24个月。
    产品说明
    苏木素和伊红联合染色简称HE染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏mu精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏mu精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中,这个过程比较缓慢,约需3-6个月不等,但生成物染色能力可维持很长时间。Delafield苏木素就属于这种。
    Delafield苏木素染液非常稳定,对核染色质染的很清晰细致,染色时间也稍长,约15-20min。适用于科研上的制片染色,用此染色液对冰冻切片染色不理想。
    染色原理:
    1. 细胞核染色的原理:
    苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏mu精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
    1. 细胞浆染色的原理:
    伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7-5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈红色。
    1. 分化作用
    染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而褪色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
    1. 返蓝作用:
    分化之后,苏木素的酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇风化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而终止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用。


    自备材料:
    盐酸乙醇分化液、蓝化液、系列乙醇、伊红染色液、4%多聚jia醛
    操作步骤(仅供参考):
    • 石蜡切片
    1. 切片脱蜡至水。
    2. 染色
    1. Delafield苏木素染液染色5-8min
    2. 自来水冲洗5-10s
    3. (可选)盐酸乙醇分化2-5s
    4. 自来水冲洗20-30s
    5. (可选)蓝化液返蓝20-40s
    6. 自来水冲洗30-60s
    7. 伊红染色液染色3-5min
    8. 自来水冲洗1-5s
    1. 脱水、透明、封固
    1. 系列乙醇快速脱水
    2. 二甲苯透明
    3. 中性树脂封片。
    染色结果:
    细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
    • 细胞
    1. 4%多聚jia醛固定10-20min
    1. 自来水冲洗2次,每次2min
    2. 蒸馏水冲洗2次,每次2min
    3. 染色步骤同石蜡切片的染色步骤,作用时间需相应缩短。
    染色结果:
    细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
    注意事项:
    1. 切片脱蜡应尽量干净,系列乙醇应经常更换新液。
    2. 盐酸乙醇分化时间需自行摸索最佳条件;分化后自来水冲洗时间应足够,以便彻底清洗酸。
    3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

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