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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
Semen cuscutae
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
英文名称:Semen cuscutae
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
异阿魏酸乙酯 HPLC≥95% 20mg 小鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3A(W3A)ELISA试剂盒 ,英文名: W3A ELISA Kit
乙酰甲基二氢两面针碱 HPLC≥95% 20mg 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA检测试剂盒Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T
蛇葡萄素F HPLC≥95% 20mg 牛腺病毒3(ADV3)抗体(IgG)试剂盒 Bovine Adenovirus 3(ADV3)aibody IgG ELISA kit
苦参醇W HPLC≥95% 20mg 英文名称humanAbELISAKIT人抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISAKIT规格:96T/48T
苦参醇M HPLC≥95% 20mg 地生兰(terresial)增殖培养基500毫升溶液/片剂
苦参醇B HPLC≥95% 20mg Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA试剂盒大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鹤庆五味子辛素 HPLC≥95% 20mg 小鼠无翅型MMTV整合位点家族成员10B(W10B)ELISA试剂盒 ,英文名: W10B ELISA Kit
党参炔醇 HPLC≥95% 20mg 兔子B细胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA检测试剂盒RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T
黄芩素 O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 牛纤维蛋白原(Fb)试剂盒 Bovine Fibrinogen,Fb Elisa Kit
甲氧基铁屎米酮 HPLC≥95% 20mg 英文名称HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
菟丝子染料法PCR鉴定试剂盒进口试剂石蜡油 Paraffin oil, light fraction 质量规格:分子生物学级,PCR Grade 大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 Rat ansforming Growth Factor β1,TGF-β1 ELISA kit
乙酸钾 Potassium acetate 质量规格:>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β1受体(TGF-β1R)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β1 receptor,TGF-β1R ELISA kit
无水乙酸钠 Sodium acetate, anhydrate 质量规格:>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit
低熔点琼脂糖;具有低凝胶温度的琼脂糖 Agarose, low gelling temperature 质量规格:BR;具有低凝胶温度 大鼠转化生长因子β2受体(TGF-β2R)试剂盒 Rat ansforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit
无水二氢钾 Potassium phosphate, monobasic, anhydrous 质量规格:>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β3(TGF-β3)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA Kit
6-苄氨基嘌呤 6-Benzylamino purine 质量规格:>99% 大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)试剂盒 Rat ansforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit
水(HPLC grade) Water 质量规格:HPLC grade 大鼠转甲状腺素蛋白(T)试剂盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit
马来酸,顺丁烯二酸 Maleic acid 质量规格:AR,HPLC>99% 大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA检测试剂盒Ratansferrieceptor,TFRELISAKit 96T/48T
硫酸铵 Ammonium sulfate 质量规格:>99%,分子生物学级 大鼠转移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)试剂盒 Rat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit
氯化铯 Cesium chloride 质量规格:>99%,分子生物学级 大鼠组胺(HIS)ELISA检测试剂盒RatHistamine,HISELISAKit 96T/48T
大鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒 Rat ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 去离子甲酰胺 Formamide deionized 质量规格:>99%,分子生物学级
大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 Rat ansforming Growth Factor β1,TGF-β1 ELISA kit 石蜡油 Paraffin oil, light fraction 质量规格:分子生物学级,PCR Grade
大鼠转化生长因子β1受体(TGF-β1R)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β1 receptor,TGF-β1R ELISA kit 乙酸钾 Potassium acetate 质量规格:>99%,分子生物学级
大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit 无水乙酸钠 Sodium acetate, anhydrate 质量规格:>99%,分子生物学级
大鼠转化生长因子β2受体(TGF-β2R)试剂盒 Rat ansforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit 低熔点琼脂糖;具有低凝胶温度的琼脂糖 Agarose, low gelling temperature 质量规格:BR;具有低凝胶温度
大鼠转化生长因子β3(TGF-β3)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA Kit 无水二氢钾 Potassium phosphate, monobasic, anhydrous 质量规格:>99%,分子生物学级
大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)试剂盒 Rat ansforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit 6-苄氨基嘌呤 6-Benzylamino purine 质量规格:>99%
大鼠转甲状腺素蛋白(T)试剂盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit 水(HPLC grade) Water 质量规格:HPLC grade
大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA检测试剂盒Ratansferrieceptor,TFR 96T/48T 马来酸,顺丁烯二酸 Maleic acid 质量规格:AR,HPLC>99%
大鼠转移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)试剂盒 Rat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit 硫酸铵 Ammonium sulfate 质量规格:>99%,分子生物学级
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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文献和实验实时荧光定量 PCR 技术(Quantitative Real-time PCR,简称 qPCR)是在 PCR 扩增过程中,通过实时监测荧光信号的变化,达到对待检测样本中初始模板定量分析的方法。当前 qPCR 技术被广泛应用于临床疾病诊断,动物疾病监测,食品安全分析等领域。随着 2020 年新冠疫情在全球的蔓延,qPCR 技术更是因其检测通量高,速度快,操作简便等优势成为新冠病毒核酸检测的有效方法被众人所熟知。 那么为了得到可靠、准确的检测结果,我们需要注意哪些方面呢?其实决定一次实验成功
长度可达 20kb,适合于各种 GC 含量的扩增,可用于多种样本的直接 PCR 如植物叶片、全血等。且扩增仅需 30s/kb,甚至于 2kb/s。如此卓越,爱不释手了吧? 4. 选择直接扩增试剂盒对粗品扩增 vazyme 生产的各种直扩试剂盒,直接对粗品进行扩增,大大减少了实验的工作周期。如小鼠基因型鉴定可以直接使用 One Step Mouse Genotyping Kit,全血扩增可以直接使用 Blood Direct PCR Kit V2。
(donor) 和能量受体 (acceptor) 对, 其中供体的发射光谱与受体的吸收光谱重叠,当它们在空间上相互接近到一定距离 (1~10 nm) 时,激发供体而产生的荧光能量正好被附近的受体吸收,使得供体发射的荧光强度衰减,受体荧光分子的荧光强度增强。 图一. 荧光共振能量转移原理图 实时荧光 PCR 技术种类 染料法 SYBR Green I 是一种比较常见的荧光染料,可以非特异的结合双链 DNA 小沟,它可以嵌合进 DNA 双链,但不结合单链。当 SYBR Green I 在溶液
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