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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
320
- 英文名:
Turbo Chemically Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
10×100μl/50×100μl
特别提示:包括Turbo化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Turbo化学感受态细胞
英文名称:Turbo Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0022
产品规格:10×100μl/50×100μl
Turbo菌株是生长最快的大肠杆菌菌株。平板上6.5小时可见克隆,营养液中摇菌4-6小时可提取质粒,缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;Turbo菌株可严格控制laclq的表达,可以克隆毒性基因;fhuA2突变赋予Turbo菌株对噬菌体T1的抗性;lacZΔM15的存在使Turbo可用于蓝、白斑筛选。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。
保存条件:-80℃
基因型:
F"proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB)glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
操作说明:
1.Turbo感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基(SOC或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的SOC或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养6.5小时以上。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2.混入目的DNA时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
我公司销售的Turbo化学感受态细胞北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验) 步骤4 :转化大肠杆菌感受态 用连接后产物转化大肠杆菌感受态细胞。市场上常见的大肠杆菌感受态细胞(例如Top10,DH5α)均可以使用,您也可以按照分子克隆中的方法自己制备感受态细胞。转化方法按照供应商的说明书或者您实验室中常用的方法进行。 在氨苄抗性的琼脂平板上37℃培养转化后细菌,大约14-16小时后,平板上出现单个细菌菌落。挑取多个菌落至氨苄抗性的培养基中培养后进行鉴定。 鉴定方法可以采用PCR鉴定或酶切鉴定。 PCR
的使用需要将人工设计的寡核苷酸片段插入pRI系列载体中特定的酶切位点之间,寡核苷酸片段中包含了针对目标基因的mRNA设计的长度为19nt的干扰片段。 合成时需要化学合成正向和反向两条寡核苷酸。正、反向寡核苷酸退火后与载体连接,插入载体XhoI,BglII位点之间,位于载体上H1启动子下游正确的位置上。连接后的载体转入哺乳动物细胞在H1启动子作用下转录产生shRNA。 1. 选择干扰序列 在RNA干扰实验中,RNA干扰序列的选择会显著影响RNA干扰效果。我们建议
多,交流就会更方便,否则用户太少,使用交流则不方便。更重要的是,使用相同的LIMS系统有利于同行之间项目合作和交流,保证了大家都在同一个平台上对话。全球顶尖的20家制药公司中有18家使用Watson LIMS管理生物分析实验室,如辉瑞、礼来、阿斯利康、强生、罗氏、诺华等等,在国内,已有超过20家的用户,如像药明康德、睿智化学这样的CRO公司,像北京医院、协和医院这样的I期临床研究机构,像上海药物所、成都安评中心、上海交通大学这样的科研院所,还有像山东绿叶、默克雪兰诺这样的制药企业。因此,Watson
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