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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
77
- 英文名:
Recombinant human epidermal growth factor
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-18℃
- 规格:
50μg|200μg|1mg
特别提示:包括重组hEGF在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:重组hEGF
英文名称:Recombinant human epidermal growth factor
产品货号:ALH612
产品规格:50μg|200μg|1mg
本品表皮生长因子是一种蛋白家族的生长因子,该家族的蛋白胞外区至少含有一个由6个保守的Cys组成3对二硫键结构域(EGF结构单元)。EGF具有促进间叶细胞和上皮细胞的增殖和分化。在体外,EGF是纤维母细胞、上皮细胞和内皮细胞的有丝分裂原,促进上皮细胞培养中的集落形成。在体内,EGF促进上皮细胞和血管的形成,并抑制胃酸的分泌。
说明:重组人EGF由原核表达系统(E.coli)重组表达制备,由53个氨基酸残基组成的非糖基化多肽,分子量为6.2kDa。
制剂成分:本产品为无菌冻干粉剂,由含20mM磷酸盐,50mM氯化钠pH为7.0的蛋白溶液经0.2um过滤后分装冻干。
复溶:建议将冻干 rHuEGF 溶解在灭菌超纯水(18MΩ-cm)中,浓度不低于100μg/ml,以待进一步稀释至工作浓度。
质量控制:
1.生物学活性:小鼠BALB/c 3T3细胞剂量依赖增殖试验测定ED50小于2ng/ml, 相应比活性为5.0×10^5IU/mg。
2.纯度:纯度大于95.0%(高效液相色谱,及还原和非还原SDS-PAGE银染)。
3.分子量:还原性SDS-PAGE,分子量为6.0KD±10%。
4.等电点:IEF分析,等电点为4.0~5.0。
5.氨基酸序列:N末端氨基酸序列为:Asn-Ser-Asp-Ser-Glu。
6.内毒素残留:LAL检测,小于0.1ng/μg (1 EU/μg) 。
储存条件:-18℃,有效期一年。
我公司销售的重组hEGF(纯度大于95.0%)价格,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验壁上形成一些微孔通道,使得DNA分子直接与裸露的细胞膜脂双层结构接触,并引发吸收过程。具体操作程序因转化细胞的种属而异。对于大肠杆菌来说,大约50ml的细菌与DNA样品混合后,置于装有电极的槽内,然后选用大约25微法拉第、2.5千伏和200欧姆的电场强度处理4.6毫秒,即可获得理想的转化效率。虽然电穿孔法转化较大的重组质粒(>100Kb)的转化效率比小质粒(~3Kb)低一千倍,但这比Ca2 诱导和原生质体转化方法理想,因为这两种方法几乎不能转化大于100Kb的质粒DNA。对于几乎所有的细菌均可找到一套
至总体积 10 ul混合后置 14~16 ℃ 水浴 6~12 h。【注意事项】1)通常 DNA 插入片段与载体 DNA 的摩尔比为 3:1 或 2:1,需根据 DNA 分子量计算,而不取决于浓度;2)平齐末端连接时,插入片段的量要远远大于载体 DNA 的量,可以为 5:1 或更多,即使这样,连接效率仍然很低。3)有时 DNA 一端是粘端,另一端是平端,这种连接与双酶切粘端连接相似;4)不匹配末端需要连接时,首先要将末端处理成平端,然后再进行连接反应。六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受
4.6毫秒,即可获得理想的转化效率。虽然电穿孔法转化较大的重组质粒(>100Kb)的转化效率比小质粒(~3Kb)低一千倍,但这比Ca2 诱导和原生质体转化方法理想,因为这两种方法几乎不能转化大于100Kb的质粒DNA。对于几乎所有的细菌均可找到一套与之匹配的电穿孔操作条件,因此电穿孔转化方法有可能成为细菌转化的标准程序。 1.1.4接合转化 接合(Conjugation)是指通过细菌细胞之间的直接接触导致DNA从一个细胞转移至另一个细胞的过程。这个过程是由结合型质粒完成的,它通常
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