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大量
- 英文名:
Enterokinase
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2年
- 供应商:
北京博尔西科技有限公司
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-20℃
- 规格:
200U
特点:融合蛋白标签酶切(His-tag、GST-tag等)等科研、生产教学实验使用。
重组牛肠激酶(r-EK)
来源:大肠杆菌
产品形式:液体
体系:50 mM Tris-HCl、50%甘油、pH8.0
比活性:≥40 KIU/mg
浓度:1U/ul
分子量:26.2 kDa
等电点:5.20
纯度:≥95%(SDS-PAGE 检测)
活性单位定义:于25℃,反应缓冲液为50 mM Tris-HCl(pH8.0),16小时切割50ug(1mg/ml)融合蛋白达95%以上所需要的酶量,定义为个活性单位U。
(注:或在37℃,16小时内将500ug的Thioredoxin-NP-27 95%降解为NP-27所需要的酶量,定义为个活性单位U)
规格:200U、1000U、4000U
保存:-20℃
有效期:3 年
相关介绍:肠激酶是一种丝氨酸蛋白水解酶,能高效专一地识别蛋白质中Asp-Asp-Asp-Asp-L(DDDDK)序列,并在赖氨酸(Lys,K)的C 端水解肽键,产生切割。肠激酶具有的高度专一性和高效酶切特性使其被广泛应用于基因工程产品的开发。天然肠激酶由1 条115 kDa 的重链和1 条35 kDa 的轻链组成,重链起锚定细胞膜的作用,轻链具有全酶完整的催化活性。本产品采用大肠杆菌分泌表达牛肠激酶的轻链活性核心区域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特别适用于基因工程融合蛋白的酶切,且专为切割重组表达融合蛋白需要而设计,含有His-6重组标签,适合于Ni-亲和层析柱的不同分离纯化方式。
注意事项:(1)肠激酶的活性影响成分:如>2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50mM Imidazole。样品中如果含有这些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl(pH8.0)。(2)磷酸盐会抑制肠激酶的活性,应避免使用磷酸盐缓冲液作为酶切体系。
相关产品目录:
融合蛋白标签酶切(目录)
★凝血酶(Thrombin)
★肠激酶(Enterokinase)
诊断试剂原料(目录)
★抑肽酶(Aprotinin)
★凝血酶(Thrombin)
★转铁蛋白(Transferrin)
★牛纤维蛋白原(Fibrinogen)
★兔脑粉(Rabbit Brain Powder)
★兔脑磷脂(Rabbit Brain Phospholipids)
★肠激酶(r-EK,Enterokinase)
★链霉亲和素(r-SA)
★重组胰岛素(rh-INS)(细胞培养等用)
★重组组织因子(rh-TF)(重组凝血活酶)
★重组脂化组织因子(rh-TFP)
★链球菌蛋白G(r-SPG)ProteinG
★重组蛋白A(r-SPA)ProteinA
★牛血清白蛋白(BSA)(高品质原料)
★新生牛血清
★小牛血清
★成牛血清
★山羊血清
★鸡血清
★昆明小鼠血清
★小鼠IgG(免疫球蛋白)
★兔IgG(免疫球蛋白)
★人IgG(免疫球蛋白)
★HRP-SA(辣根过氧化物酶标记链霉亲和素)
★HRP-SPA(辣根过氧化物酶标记蛋白A)
★HRP-SPG(辣根过氧化物酶标记蛋白G)
★HRP-羊抗鼠IgG(辣根过氧化物酶标记二抗)
★HRP-羊抗兔IgG(辣根过氧化物酶标记二抗)
★HRP-羊抗人IgG(辣根过氧化物酶标记二抗)
★HRP-兔抗羊IgG(辣根过氧化物酶标记二抗)
★羊二抗:羊抗鼠 IgG、羊抗兔IgG、羊抗人 IgG、羊抗鸡 IgG
(多克隆抗体原料:点膜、包被、标记用)
★兔二抗:兔抗人IgG、抗羊IgG、抗犬IgG、抗鼠IgG、抗鸡IgG、抗牛IgG、抗猪IgG
(多克隆抗体原料:点膜、包被、标记用)
★兔抗FITC(荧光素)、兔抗SPA(蛋白A)、兔抗Biotin(生物素)、兔抗HRP(辣根酶)
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文献和实验重组药用蛋白要求,SDS-PAGE纯度大于95%,HPLC纯度大于95%,Western Blott单一条带,去除内毒素。 3、纯化设计分析 此为一典型的小分子蛋白融合表达实例。 由于有his6-tag融合可溶表达,可以采用Ni柱来进行初步纯化。 融合蛋白的理论等电点为5.9,可以考虑用Q柱、DEAE柱来吸附纯化。 融合蛋白需要酶切去除融合片断,要做肠激酶酶切工艺。 蛋白A的理论等电点为9.7,可以考虑用SP柱来吸附纯化。 酶切后的蛋白纯化可利用his-tag和pI的差异
蛋白的理论等电点为5.9,Trx(DDDDK前158aa)的理论等电点为5.4,蛋白A的理论等电点为9.7。2、纯化要求 符合重组药用蛋白要求,SDS-PAGE纯度大于95%,HPLC纯度大于95%,Western Blott单一条带,去除内毒素。3、纯化设计分析 此为一典型的小分子蛋白融合表达实例。 由于有his6-tag融合可溶表达,可以采用Ni柱来进行初步纯化。 融合蛋白的理论等电点为5.9,可以考虑用Q柱、DEAE柱来吸附纯化。 融合蛋白需要酶切去除融合片断,要做肠激酶酶切
检测、鉴定。 融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。 MBP(麦芽糖结合蛋白) MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合











