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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
121
- 英文名:
Gel DNA Recovery Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT避光
- 规格:
100T
特别提示:包括凝胶DNA回收试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:凝胶DNA回收试剂盒
英文名称:Gel DNA Recovery Kit
产品货号:MT0047
产品规格:100T
本试剂盒优点为能更快更好的溶胶,回收的效率更高。该凝胶回收试剂盒采用机械切割的硅胶膜吸附材料作为离心吸附柱,应用优化好的特定缓冲液,可选择性地结合回收目标DNA,去除污染杂质;溶胶液的溶胶效率高,适用于TAE和TBE缓冲液;使用我司DNA凝胶回收试剂盒每次可纯化得到高达40μg的DNA片段(70 bp~20 Kb),回收率高达70~95%。回收的产物可用于PCR、酶切、连接反应、测序等各种分子生物学实验。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| Gel Buffer 1(溶胶液) | 60ml |
| Gel Buffer 2(结合液) | 10ml |
| Washing Buffer(洗涤液) | 20ml |
| Elution Buffer(洗脱液) | 10ml |
| 吸附柱 | 100套 |
注:首次使用Washing Buffer(洗涤液)时应加入80ml无水乙醇并混匀,请及时做好标记。
保存条件:室温避光保存,有效期1年。
操作方法:
1.在琼脂糖凝胶-EB电泳后,在紫外灯上小心的把所需的DNA片段切下,尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液,称重,装入1.5ml离心管。
2.按照凝胶的重量近似的估计其体积,假设其密度为1g/ml,凝胶的体积可按如下方法计算:若凝胶薄片的重量为0.2 g,则其体积为0.2ml。
3.在上述离心管中加入3倍体积的Gel Buffer 1(如0.2 g胶,加入600ul Gel Buffer 1),颠倒混匀后放入50℃ 水浴锅中加热5~10 min。每隔2 min颠倒混匀一次。
4.溶胶后,加入0.1倍Gel Buffer 1体积的Gel Buffer 2(如0.2 g胶,加入了600ul Gel Buffer 1,再加入60ul Gel Buffer 2),混合均匀,此时溶液应为澄清黄色。
5.待溶液冷却至室温,然后将溶液直接倒入吸附柱中, 13000rpm室温离心30 s。
6.再次将过柱液倒入吸附柱中,13000rpm室温离心30 s,倒掉收集管中的液体。
7.向吸附柱中加入500μl Washing Buffer(确认已加入乙醇),13000rpm室温离心30 s,弃收集管中废液。
8.重复步骤7一次。
9.将吸附柱重新放入套管中,再13000rpm室温离心2 min。
10.将吸附柱置于1.5ml离心管上,静置2 min,使痕量乙醇完全挥发后加入20~30μl Elution Buffer至管内柱面上,放置1分钟。
11.13000rpm室温离心2 min,所得液体即为回收的DNA溶液。
我公司销售的凝胶DNA回收试剂盒北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验。 二、DNA回收试剂盒(QIAquick Gel Extraction Kit Protocol) 1. 紫外灯下仔细切下含待回收DNA的凝胶,置1.5ml离心管中,称重。 2. 加入Buffer QG(每100mg凝胶加Buffer QG 300μl),置50℃水浴10min。 3. 若回收片段小于500bp或大于4kb,则需加入异丙醇(每100mg凝胶加异丙醇100μl),混匀。 4. 将小柱放在2ml收集管上,将上述溶液加于柱上。 5. 4℃离心13000g×
原理】 1.DNA片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。 2.利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶作用下,可以把PCR产物插入到质粒载体的多克隆位点,可用于PCR产物的克隆和测序。
Q:利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段? A: 可能有以下几个原因: 1. 胶块未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次数辅助溶解; 2. 胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收; 3. 电泳缓冲液pH太高,硅基质膜在高盐低pH结合DNA,如pH太高,应作适当调整; 4. 漂洗液中未加入无水乙醇。 Q:能否改用去离子水洗脱? A:可以。但是实验室所用纯水一般pH偏低,可利用NaOH适当调高
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