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- R419A/B
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃保存
- 保质期：
2年
- 英文名：
PreScript Ⅱ RT ProMix for qPCR
- 库存：
充足
- 供应商：
广州英赞生物科技有限公司
预混液形式的qRT-PCR优选试剂
产品概述
产品内容
| 组分 | R419A | R419B |
| 2× RT Reaction Mix | 500μL | 1ml |
| Prescript Ⅱ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
| RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
更高效的逆转录效率：PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性，提高了逆转录效率
操作简便的预混型试剂：只要添加模板RNA和水，就可以简便高效率地合成cDNA，且重复性良好
宽广的模板使用范围：反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用
广阔的可定量扩增区间：比例优化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix可均一、高效地在RNA全序列范围内进行逆转录，因此可得到更广的可定量扩增区域
实验案例
1. 优异的cDNA合成效率
2. 强大的逆转录能力
应用范围
合成用于qPCR的cDNA模板，特别是较长的cDNA合成；全长cDNA文库的构建。
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文献和实验成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
的动态范围或线性度最佳，可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率，以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验，可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
份，单独分析和比较，以检验裂解。利用CelluLyser，我们发现各等份之间的一致性很好，说明细胞均匀地裂解。利用加热或蒸馏水来裂解细胞通常产生异质的裂解液，导致各等份不均一。通过RNA加标可检测回收效率和重复性。我们设计了一个带有5’帽子和A尾巴的通用加标，以模拟天然的mRNA。RNA加标可添加到裂解液中，或显微注射到细胞中。逆转录也应当优化。因引物结合、目的基因和逆转录酶的不同，RT产量可相差200倍之多。此外，添加到RT预混液中的裂解液的量也必须仔细调整，以避免抑制，同时让RT产量最高。预扩
