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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
206
- 英文名:
Blunting & Ligation Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷冻(-20℃)
- 规格:
10次|20次
特别提示:包括双链DNA补平和连接试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:双链DNA补平和连接试剂盒
英文名称:Blunting & Ligation Kit
产品货号:GS0123
产品规格:10次|20次
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
双链DNA补平和连接试剂盒是利用大肠杆菌DNA多聚酶I的Klenow片段多聚酶活性能够补平不互补的5’端突出为基础。对于用2个不同限制性内切酶酶切所获得的片段,可以选择性补平一端。再通过T4 DNA连接酶对平末端DNA进行有效连接,此试剂盒操作简便,全过程可在1h内完成。在连接缓冲液中加入PEG提高平末端DNA的连接效率。连接过程中载体DNA可自环化,片段会连成寡聚体。优化插入片段和载体末端浓度和比率有利于提高正确连接产物的产率。
特点
- 操作简便,全过程可在1.5 h内完成。
- 在连接缓冲液中加入PEG提高平末端DNA的连接速率。
应用
连接、转化
使用说明
请参考产品说明进行实验操作。
组份
Klenow DNA Polymerase,3U/μl;10×Klenow Reaction Buffer;0.5mMdNTP Mix;T4 DNA Ligase,2 U/μl;10×Ligation Buffer;50%PEG 4000;Sterilized ddH2O;说明书。
我公司销售的双链DNA补平和连接试剂盒优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验实验原理 DNA重组是将外源DNA与载体分子连接,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。 重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。常用的DNA连接酶是T4噬菌体DNA连接酶,它不但能使粘性末端的DNA分子连在一起,而且能使平末端的双链DNA分子连接起来,但这种连接的效率比粘性末端的连接效率低,一般可通过提高T4噬菌体DNA连接酶浓度或增加DNA浓度
、省时间。同时在敏感性和质量控制方面比生物素标记技术要优越,可以检测出人基因组 DNA中的单拷贝基因。地高辛标记法显示的颜色为紫蓝色(标记碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶显色系统),有较好的反差背景。 核酸探针根据标记方法的不同可粗略分为放射性探针和非放射性探针两类。根据探针的核酸性质不同可分为DNA探针、RNA探针、cDNA探针、cRNA探针和寡核苷酸探针等。DNA探针还有单链DNA(Single stranded, ssDNA)和双链DNA(Double stranded, dsDNA)之分
【交流】核酸抽提的基础:仅供献身分子生物学研究者参考 (9-30 日补充)
剂则是通过使蛋白质变性,破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质,从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶;利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段,促进核酸与蛋白质的分开,同时,也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂 (如 GIT、GuHCl 等) 裂解的,该方法已经成为了 RNA 抽提的主流,却不是基因组 DNA 抽提的主流。 最常用的纯化方法,一是 PC 抽提 + 醇沉淀,二是介质纯化。第一种方法是利用 PC 对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质,实现核酸与蛋白
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