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- 百奥莱博
- MQ0050-SZT
- 北京
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
77
- 英文名：
Tuner(DE3)Chemically Competent Cell
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
- 规格：
10×100μl/50×100μl
特别提示：包括Tuner(DE3)化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Tuner(DE3)化学感受态细胞
英文名称：Tuner(DE3)Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0050
产品规格：10×100μl/50×100μl
Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株，此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。
此菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如 pET系列)的基因。
λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于Tuner的染色体上，所以称为Tuner(DE3)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。
Tuner(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1(DE3)
操作说明：
1.取100μl冰上融化的Tuner(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-40mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
我公司销售的Tuner(DE3)化学感受态细胞北京供应商，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验（ DE3 ）表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容，可用于 pET-32 载体，硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择，因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株，还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
High Level Expression of Recombinant Proteins in E. coli
) plus pRARE Tuner(DE3) lacZY deletion mutant ADA494(DE3) trxB mutant Origami(DE3) trxB and gor mutations Expression Plasmid Elements Origin of Replication (ColE1) Selectable marker (ampicillin, kanamycin or chloramphenicol resistance)
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择，现系统地解答一下，供新手借鉴。
以 AccepTor TM 载体或 perfectly Blunt a 载体形式提供，便于快速 PCR 克隆 · 目标基因无基础水平表达，消除了毒性基因产物相关的质粒不稳定性 · 表达水平与经典 pET 载体相同 · 用 Tuner TM (DE3)pLacI 宿主菌实现真正的表达水平“变阻器”控制。 PET 系统：大肠杆菌中蛋白表达的金字招牌 pET 载体中，目标基因克隆到 T7 噬菌体强转录和翻译信号控制之下，并通过在宿主细胞提供 T7 RNA 聚合酶来诱导表达。 Novagen
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