Tuner(DE3)化学感受态细胞北京供应商

特别提示：包括Tuner(DE3)化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Tuner(DE3)化学感受态细胞
英文名称：Tuner(DE3)Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0050
产品规格：10×100μl/50×100μl

Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株，此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。
此菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如 pET系列)的基因。
λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于Tuner的染色体上，所以称为Tuner(DE3)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。
Tuner(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1(DE3)
操作说明：
1.取100μl冰上融化的Tuner(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时，IPTG浓度可选(0.1-40mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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