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- 百奥莱博
- BTN80806-APF
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
946
- 英文名：
E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京大肠杆菌TOP10化学感受态细胞优惠促销是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大肠杆菌TOP10化学感受态细胞等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
产地：国产|进口
规格：0.1mL*10
编号：BTN80806
本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。
菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
关键词：E.coli TOP10 Chemical Competent Cell,BTN80806,大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
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| 编号 | 名称 |
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| BTN170103 | Schiff试剂(雪夫试剂)(希夫试剂) |
| BTN131143 | AMPPD |
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| BTN80906 | 一站式miRNA柱式大提试剂盒 |
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| BTN130969 | 冷冻型血液RNA保存液 |
| BTN100908B | 一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD) |
| BTN130897 | YPDG液体培养基 |
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| BTN130511 | 大肠杆菌JM110化学感受态细胞 |
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| BTN60702 | 10%SDS溶液(不含RNase) |
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| BTN81224 | BCIP/NBT显色试剂盒 |
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10×连接酶Buffer 1 μl 加水补足 10 μl 接连反应条件和时间参照您购买的连接酶说明书进行。 为了减少空载体自连，连接反应完成后，在连接反应体系中加入1 μl BglII，37 ℃反应30 min，切割连接上的空载体。(选做) 步骤4：转化大肠杆菌感受态 用连接后产物转化大肠杆菌感受态细胞。市场上常见的大肠杆菌感受态细胞(例如Top10，DH5-α)均可以使用，您也可以按照分子克隆中的方法自己制备感受态细胞。转化
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