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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
296
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃避光
- 规格:
150ml
特别提示:包括细胞固定/破膜试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞固定/破膜试剂盒
产品货号:HR0573
产品规格:150ml
固定液、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定液起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用;破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时,对待测细胞进行固定、破膜处理后,加入相应抗体或检测试剂,孵育一定时间即可上机分析。
储存条件:4℃避光保存,勿冰冻。
有效期:一年。
使用方法:
1.收获待测细胞,1000 rpm离心10分钟,弃上清;
2.加入500μl预冷的固定液;
3.室温孵育10分钟;
4.1000 rpm离心10分钟;
5.弃上清,加入PBS洗一次,1000rpm离心10分钟;
6.弃上清,加入1.5 ml破膜剂;
7.室温孵育10-15分钟;
8.1000 rpm离心5分钟;
9.弃上清,加入适量破膜剂重悬细胞;
10.加入检测抗体进行染色后,用流式细胞仪进行分析。
我公司销售的细胞固定/破膜试剂盒价格,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验Rosa26-EYFP(CD4/EYFP)小鼠脾细胞中观察到,未经处理的活细胞EYFP荧光信号最强;然而,使用FoxP3染色试剂盒(含Fix/Perm和Perm两步法)后,EYFP荧光几乎完全消失。值得注意的是,若在标准染色流程前先用2%多聚甲醛(PFA)进行预固定,则EYFP信号可有效保留。 这一现象表明,荧光丢失并非源于荧光蛋白的化学降解,而是由于Fix/Perm缓冲液固定能力不足,导致可溶性胞质EYFP在后续破膜和洗涤步骤中被被动洗脱出细胞。 怎样解决
的帖子,共:1个★ Triton X-100 曲拉通X-100的英文全称 ★以上为检索SOS版块发表的帖子,共:1个★ (交流)介绍6种针对免疫荧光染色的细胞固定方法 (请教)几种液体的配法 (求助):免疫组化问题 (求助)Triton X-100的使用方法 (求助)Triton溶液配方 (求助)关于Triton的浓度和使用 (求助)关于免疫组化的洗涤液 (求助)请高手帮助翻译一下 (求助)细胞免疫组化破膜问题 Re:(交流)免疫组化染色过程中存在的问题、原因
蛋白从膜表面转移到胞浆中,故应选择冰冷的无水甲醇或无水乙醇,同时应注意甲醛会挥发,在4-8°C不宜储存太久。 固定时间:取决于组合块的大小和类型,对于大多数组织,18-24h较为理想,细胞固定时间较短,一般2%的甲醛室温固定20min即可。 2. 透化 通透的目的是使抗体进入胞内。0.5% Triton X-100 室温通透20 min(针对胞内抗原,若是细胞膜上表达的抗原则省略该步骤);除了Triton X-100,丙酮也可作为通透剂,并且丙酮固定后的样品不需要通透。 3. 封闭 封闭可减少
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