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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
24
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
产品仅供科研使用特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
产品名称：假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Yersinia pseudotuberculosis
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
注意事项：
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
PCR实验外包服务：
PCR起源：荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比，FQ-PCR具有许多优点：1、封闭反应，无需PCR后处理。2、特异性强，灵敏度高。3、采用对数期分析，摒弃终点数据，定量准确。4、定量范围宽，可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测，结果直观，避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全，缩短时间，提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；
3. 以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；
3. 阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。
假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点：
1. 一站式，足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR（PCR 按 30 uL 体系计算），但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂（如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂）。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合，适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组，需从本公司采购 AFLP（EcoRI-TaqI）组合。
3. 各种参数都经过优化，一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间，可重复 性好，误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料（如动物和植物），对于基因组 在 50-500 Mb 的材料（如细菌和真菌）或 50Mb 以下的材料（如质粒，cosmid， BAC，YAC 和 PAC 等），需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物（8 种）AFLP 引物对。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F伊洛马司他(GM6001)Ilomastat,GM6001,Galardin质量规格：>98%,MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂
CSF1R Others Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 愈创木酚缩水甘油 Guaiacol glycidyl ether质量规格：>98%
T-105AIII型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL4-氨基安替比林4-Aminoantipyrine质量规格：AR,分析
SK-MEL-1, 人皮肤色素瘤细胞 白血病细胞,CEM细胞 SW579(人甲状腺癌细胞)N-溴代丁二(NBS)N-bromosuccinimide质量规格：AR
小鼠胚胎成纤维细胞;MEF溶葡球菌酶,溶葡萄球菌酶 Lysostaphin质量规格：BR,5000U/Pack
人海马趾神经细胞cDNAHN-h cDNA吡罗昔康-d3Piroxicam-d3质量规格：美国进口
PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 泊沙康唑-d4Posaconazole-d4质量规格：美国进口
T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795利福昔明标记d6Riimin - Labeled d6质量规格：美国进口
HCCC-9810细胞，人肝癌亚力山大细胞 人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株,7WCY1.0细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2罗匹尼罗N-氧化物Ropinirole N-Oxide质量规格：美国进口
Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×23-氧罗匹尼罗盐酸盐3-Oxo Ropinirole Hydrochloride质量规格：美国进口
小鼠腹脊髓神经元MN-vsc癸酸胆酯质量规格：Cholesterol Decanoate
CD3D Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3d / CD3 delta 人细胞裂解液 (阳性对照) 氢化肉桂酸胆酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Cholesterol Hydrocinnamate
大鼠管内皮细胞完全培养基 100mL胆酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Cholesterol Laurate
HCC-LM3人肝癌细胞 HCC-LM3 human hepatocarcinoma cells DMEM+10%FBS豆蔻酸胆酯(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)Cholesterol Myristate
LRIG1 Protein Mouse 重组小鼠 LRIG1 / LIG-1 蛋白 (His 标签)番泻苷C（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Sennoside C
假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒人脑成纤维细胞完全培养基 100mL邻本二酸二(2-乙基己基)酯10毫升
3T3-E1细胞，鼠胚成骨细胞 U937(组织细胞瘤) 山羊皮肤细胞;WGS1录化;六水三录化 Chromic chloridq hqxchydrctq 1
EFNB2 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 标签)石蜡油 (培养级) Mineral oil (for mouse embryo cell cul... 8042-47-5 100ML 通用试剂
CW-2(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)M-H琼脂平板1米
人表皮色素细胞-中色素HEM-m(除草剂)
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验相关实验
研究1、 产前诊断：人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗，到目前为止，还只能只能通过产前监测，减少病婴出生，以防止各类遗传性疾病的发生，如为减少X连锁遗传病患儿的出生，从孕妇的外周血中分离胎儿DNA，用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法，易为孕妇所接受。2、 病原体检测：采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
高质量cDNA应保证无基因组DNA残留 在提取RNA的过程中，常常会有基因组DNA的残留，从而导致实验结果的不准确性或假阳性结果的出现。2008年，Nature Protocol的一篇关于荧光定量PCR实验研究的文章1中明确指出，在合成cDNA第一链之前应去除基因组DNA残留，以免cDNA中有基因组DNA的存在，影响高灵敏度的荧光定量PCR实验结果： 图1 那么，如何避免基因组DNA对荧光定量PCR结果的影响呢？对于真核生物，由于内含子的存在，可以选择
的后处理，完全闭管扩增和检测，同时采用了dUTPUNG系统，有效地防范了PCR扩增物的污染，避免假阳性结果，为临床提供可靠的诊断依据。 4、操作简便、耗时短。该法在特定的荧光PCR检测仪上进行扩增和检测，不需要进行电泳或杂交的操作，只需要2-3小时即可完成PCR过程，有利于提高报告出具的速度，无须人工判断，自动收集和分析数据，观察结果可靠。 实时荧光定量PCR检测，主要是在一定的反应体系中，通过首先查找到样本中结核杆菌的基因，并进而对基因上某高保守的特定区段进行体外快速高保真的复制增殖
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