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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
规格:Bacillus atrophaeus
产品仅供科研使用分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
PCR实验外包服务:
PCR起源:荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。与普通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点:1、封闭反应,无需PCR后处理。2、特异性强,灵敏度高。3、采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确。4、定量范围宽,可达到10个数量级。5、仪器在线式实时检测,结果直观,避免人为判断。6、可实现一管双检或多检。7、操作安全,缩短时间,提高效率。荧光定量 PCR是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
萎缩芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒具有下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
晕苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)Coronene ELISAKitFK人趋化因子规格:48T/96T 大鼠白介素33(IL-33)试剂盒 Rat Ierleukin 33,IL-33 ELISA Kit
晕苯(升华提)(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Coronene (purified by sublimation) 小鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit CLIAKitfoGF-Alpha(MouseansforminggrowthfactorAlpha)ELISAKit小鼠转化生长因子α规格:48T/96T
心环烯(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)Corannulene 大鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA检测试剂盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T 染色质共沉淀分析(CHIP)20样本
2,5-二苯基-1,3,4-恶二唑(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole 人Salusin Beta(Salusin β)试剂盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit ELISAKitENA-Ab人抗可提取核抗原抗体规格:48T/96T
超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒50 528-58-5氯化矢车菊素规格 Cyanidin Chloride
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA试剂盒大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 6681-18-1氯化木兰花碱厂家 Magnoflorine chloride
小鼠肿廇蛋白P63(TP63)ELISA试剂盒 ,英文名: TP63 ELISA Kit 88901-36-4罗汉果皂苷V说明书 Mogroside Ⅴ
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8ELISAKit 96T/48T 10097-84-4罗通定品牌 Rotundine
犬髓过氧化物酶(MPO)试剂盒 Dog Myeloperoxidase,MPO ELISA kit 100462-37-1络塞定规格 Rosiridin
524-30-1秦皮苷规格 Fraxin 猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA检测试剂盒PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T
524-17-4蝙蝠葛碱说明书 Dauricine 猪(NO)试剂盒 Pig niic oxide,NO ELISA Kit
524-17-4蝙蝠葛碱厂家 Dauricine 重组腺病毒载体转染试剂盒10
萎缩芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒犬凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)试剂盒 Canine thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit 19083-00-2纤细薯蓣皂苷说明书 Gracillin
英文名称HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP3ELISAKIT人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)规格:96T/48T 58-61-7腺苷品牌 Adenosine
化人体RUNX3基因重组表达载体(pcDNA-RUNX3)测序引物对2OD 21339-55-9相思子碱规格 Abrine
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA试剂盒大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 104472-68-6香蒲新苷厂家 Typhaneoside
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 ,英文名: Lp-α ELISA Kit 520-34-3香叶木素说明书 Diosmetin
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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