- ￥2990
- gelatins
- 国内
- JLC-G9897
- 2026年03月23日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
假结核耶尔森菌PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增假结核耶尔森菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
6. 本产品由江蓝纯生物提供，不得用于临床诊断。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 假结核耶尔森菌PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 假结核耶尔森菌PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
假结核耶尔森菌PCR试剂盒
使用方法
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 假结核耶尔森菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 假结核耶尔森菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（假结核耶尔森菌PCR阳性对照1000倍稀释液） | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应（35个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验三句话读懂一篇 CNS：运动越多，新冠重症和死亡风险越低 | 为什么女性更易患老年痴呆？
。 2022 年 12 月 16 日，西北农林科技大学沈锡辉和福建师范大学欧阳松应联合在 Nature Communications 杂志发表研究论文 A secreted effector with a dual role as a toxin and as a transcriptional factor。 该研究表明假结核耶尔森菌分泌一种效应物 CccR，其为具有毒素和转录因子双重作用的分泌效应子。效应器由 VI 型分泌系统（T6SS）分泌，其通过细胞间接触和接触无关的方式进入附近相同物种
Trichosporon spp 丝孢酵母某些种 Veillonella parvula 小韦荣球菌 Veillonella spp 韦荣氏球菌属某些种 Versinia enterocolitica 小肠结肠炎耶尔森菌 Versinia pseudotuberculosis 假结核耶尔森菌 Vibrio alginolyiicus 解藻朊酸弧菌 Vibrio cholerae 霍乱弧菌 Vibrio fluvialis 弗氏弧菌 Vibrio fluvialis 河流孤菌
带（1）引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。（2）循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。（3）酶的用量偏高或酶的质量不好，应降低酶量或调换另一来源的酶。（4）退火温度偏低，退火及延伸时间偏长。应提高退火温度，减少变性与延伸时间，也可采用二种温度的PCR扩增。（5）样品处理不当。（6）Mg2+浓度偏高，因适当调整Mg2+使用浓度。（7）若为PCR试剂盒，也可能时试剂盒本身质量有问题。（五）PCR假阳性结果（1）引物设计不当，应调换引物。（2）循环参数不合适，导致非特异
