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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
405
- 英文名:
Klenow Fragment(3'→5' exo-)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
250U
特别提示:包括Klenow片段在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Klenow片段
英文名称:Klenow Fragment(3"→5" exo-)
产品货号:JN0076
产品规格:250U
本品是DNA聚合酶I的N末端截短物,它保留了DNA聚合酶活性,但缺乏单链特异的3"-5"外切酶活性以及双链特异性5"-3"外切酶活性。常用来补齐双链DNA的3"端凹陷,或应用于随机引物标记及测序等分子生物学实验。
产品用途:
1、用随机引物制备探针;
2、随机引物法标记;
3、cDNA第二条链的合成。
使用建议:Klenow Fragment(3´→5´exo-)因去除了 3´→5´核酸外切酶的活性,故不适用于生成平末端的反应。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:在37℃条件下,30min内使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。
热失活:72℃,20分钟。
储存条件:-20℃
我公司销售的Klenow片段现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验PCR(Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶链式反应,对于常年狂奔在实验室的实验狗来说并不陌生。那么,对于 PCR 反应的核心成份,DNA 聚合酶,你选对了吗? 常见的 DNA 聚合酶如 Taq、Phanta、Pfu、KOD、Primerstar、Klenow、Bst、Phi29 等等。根据耐热性来分可分为耐热酶和常温酶。耐热聚合酶如 Taq、Pfu、KOD、Primerstar 等,常温聚合酶包括 Klenow、Bst、Phi29 等。根据保真度来分,高保真聚合
随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火),以提供3, 羟基端,在无5, →3, 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下,在引物的3, 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时,即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列,引物与模板的结合以一种随机的方式发生,标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
/GATCY) 这几个酶切产物粘端突出部分都一样是 5’GATC,能互补,可以相互连接。此外,所有平末端酶切产物都可以相互拼接,只是连接效率低些。要是运气再背点、酶切粘端怎么都不配对?用 Klenow 大片段或者T4聚合酶或“削平”或“补齐”得到平末端,再“强行连接”。。。这种目标片段前后都是平端的、或者单酶切的,载体“自恋”(自我连接)还可以用大小区分,目标片段可能正向接入或者倒装,如何在筛选时进行区分,又多了一个麻烦事儿。要是用到甲基化敏感的内切酶,比如 HPhI(对 Dam、Dcm 甲基化敏感
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